Nature子刊：陈小华/谭敏佳团队开发时空动态的蛋白质

来源：生物世界 2023-05-06 09:07

蛋白质与DNA的相互作用在生物学过程中发挥着关键作用。精确解析蛋白质-DNA相互作用能够揭示二者相互识别机制和动态变化，对于深入理解生理和病理条件下基因的调控机制至关重要。虽然已有的研究方法在表征高亲和力的DNA-蛋白质（尤其是转录因子）的识别和作用机制方面取得了很大的进展，但是对于生物体系中低丰度的蛋白质，以及动态、微弱的蛋白质-DNA复合物的分析仍极具挑战。

2023年4月27日，中国科学院上海药物研究所陈小华课题组和谭敏佳课题组合作，在Nature Chemistry期刊发表了题为：Spatiotemporal and global profiling of DNA protein interactions enables discovery of low-affinity transcription factors的研究论文。

该研究在前期开发的光诱导PANAC光点击化学的基础上，发展了一种具有赖氨酸选择性的蛋白质-DNA交联方法（Light-Induced Lysine (K) Enabled Crosslinking，简称LIKE-XL），并结合团队在深度定量蛋白质组学分析方面的丰富经验和技术优势，实现了对蛋白质-DNA动态互作、包括弱相互作用的转录因子-DNA的时空动态性深度解析。

研究团队首先设计合成了含光交联基团的DNA探针，该探针能够在低浓度（微摩尔浓度）、短时间（5-10分钟）高效交联相互作用的蛋白质。结合基于质谱的定量蛋白质组学技术，LIKE-XL全局性解析方法在鉴定相互作用蛋白质数目上远超基于非共价作用的技术；比非特异性的交联方法显示更优的效率和更高的灵敏度。LIKE-XL策略不仅成功地鉴定到了预期低亲和力的转录因子-DNA相互作用，还发现了目标DNA序列上新型转录因子及结合位点。

进一步，通过整合交联位点、结构生物学信息和分子对接，该研究发现了弱结合能力的转录因子与DNA结合的新作用模式。借助LIKE-XL技术，合作团队全局性揭示了表观遗传药物（如去乙酰化酶抑制剂SAHA）时间分辨的下游转录因子互作网络动态全景。