Communications Biology:研讨职员开辟出基于液滴微流控的链霉菌高通量挑选技术平台 |
![]() |
链霉菌是紧张的工业微生物,可以临盆卵白、小分子药物等高附加值产物。工业临盆中,罕用随机诱变伎俩发生年夜量的链霉菌渐变库,但缺乏与之相适配的高通量挑选伎俩用以得到目的渐变株。已报道的基于流式细胞分选的办法只能对链霉菌的原生质体或孢子进行挑选,因为等次级代谢产品多发生于菌丝发酵的平台期,因而原生质体或孢子均无奈代表链霉菌的真实发酵状态,并不得当次级代谢产品的挑选;流式细胞仪也无奈挑选胞外产品旌旗灯号,是以开辟链霉菌高效培育、检测和分选的高通量挑选技术具备紧张意义。
中国迷信院天津研讨所研讨员王猛率领的高通量编纂与挑选平台试验室,开辟了基于液滴微流控的链霉菌高通量挑选技术。研讨调整与优化链霉菌孢子液滴包埋参数及菌株液滴分选参数,使链霉菌高通量挑选技术的检测分选速率到达约每小时1万个菌株,人工混库的单轮分选富集率超过330倍。团队运用该技术在启动子强度阐发、启动子改革、排泄卵白表白等方面进行了测试利用,对数十种内源和异源启动子的阐发标明,液滴微流控技术测定的启动子表白强度旌旗灯号与传统的酶标板和显微镜荧光测定成果一致;从弱启动子ermE*p和强启动子gapdh(EL)p动身的启动子改革成果标明,采取液滴微流控挑选技术可以梯度改动启动子强度,无效得到启动子加强或削弱的渐变体,空虚元件库用于后续的代谢工程改革,基于弱启动子ermE*p改革及挑选,得到相比家养型强度为133.5%、343.2%和347.9%的渐变体;基于强启动子gapdh(EL)p改革及挑选,得到强度为家养型10.1%、24.7%和94.6%的渐变体;针对链霉菌胞外产品纤维素酶,利用液滴微流控技术疾速从随机渐变库中挑选得到纤维素酶产量别离为动身菌株169.2%至211.4%的多个高产菌株。
此外,研讨标明,链霉菌从孢子动身可以在液滴中稳定培育7天以上,实现萌生、分解、进行各类生物合成直至走向衰亡的完全性命周期。这一个性使开辟的基于液滴微流控的链霉菌高通量挑选平台可以用于菌体成长晚期关于启动子等调控元件的挑选,也可以用于成长中期关于胞内、胞外目的卵白的挑选,且在次级代谢产品如等挑选方面具备利用前景。(100yiyao.com)
医药网新闻
- 相关报道
-
- STTT:膳食脂肪酸调教T细胞!港大团队发现,棕榈酸会削弱γδ-T细胞的抗肿瘤作用,而油酸可逆转 (2025-07-10)
- 《神经病学》:重大人生打击,与阿尔茨海默病相关病理发展和大脑结构的变化有关! (2025-07-10)
- J Hematol Oncol:突破T细胞白血病治疗瓶颈——双靶点CAR-T细胞有望带来新希望 (2025-07-09)
- 《自然·医学》:世卫组织最新预警!全球08-17年出生的人,或有1560万会患胃癌,76%归因与幽门螺杆菌感染,2/3发生在亚洲 (2025-07-09)
- 精鼎医药宣布两位 FDA 权威专家加入我司咨询团队,进一步增强监管事务、医学及 AI 领域专业实力 (2025-07-08)
- Mater Today Bio:干细胞球联手纳米颗粒水凝胶精准改善糖尿病创面环境,加速伤口愈合新突破 (2025-07-08)
- J Anim Sci Biotechnol研究揭秘美味密码:益生菌联手重塑肠道菌群,经肠-肌轴提升猪肉鲜味与品质 (2025-07-08)
- Science:告别序列依赖,为你的染色体“扫码”——每条染色体竟自带独一无二的“条形码 (2025-07-07)
- 《自然》子刊:刷新认知!哈佛团队发现,乙肝病毒自身或不致肝癌,但会增强致癌物的作用 (2025-07-07)
- 《科学》子刊:科学家揭示帕金森病中不同的发病轨迹,或为定义亚型和治疗靶点提供新见解! (2025-07-07)
- 视频新闻
-
- 图片新闻
-
医药网免责声明:
- 本公司对医药网上刊登之所有信息不声明或保证其内容之正确性或可靠性;您于此接受并承认信赖任何信息所生之风险应自行承担。本公司,有权但无此义务,改善或更正所刊登信息任何部分之错误或疏失。
- 凡本网注明"来源:XXX(非医药网)"的作品,均转载自其它媒体,转载目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责。本网转载其他媒体之稿件,意在为公众提供免费服务。如稿件版权单位或个人不想在本网发布,可与本网联系,本网视情况可立即将其撤除。联系QQ:896150040