Analytical Chemistry:提出基于纳升电喷雾质谱间接进样的代谢组学阐发新办法 |
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起源:年夜连化物所 2021-08-12 07:37
近日,中国迷信院年夜连化学物理研讨所生物分子高分辩拆散阐发及代谢组学研讨组研讨员许国旺团队在纳升电喷雾质谱间接进样的代谢组学阐发新办法研讨中取得停顿,基于纳升电喷雾间接进样的高分辩质谱(nanoESI DI-HRMS),别离联合质谱信息非依赖采集(DIA)、拼接式质谱采集、毛细管微探针取样等技术,完成了年夜规模人群样本代谢组的高通量阐发和20个哺乳植物细胞脂质组近日,中国迷信院年夜连化学物理研讨所生物分子高分辩拆散阐发及代谢组学研讨组研讨员许国旺团队在纳升电喷雾质谱间接进样的代谢组学阐发新办法研讨中取得停顿,基于纳升电喷雾间接进样的高分辩质谱(nanoESI DI-HRMS),别离联合质谱信息非依赖采集(DIA)、拼接式质谱采集、毛细管微探针取样等技术,完成了年夜规模人群样本代谢组的高通量阐发和20个哺乳植物细胞脂质组的高通量高敏锐检测。
色谱-质谱联用是今朝代谢组学阐发的主流办法,然则色谱拆散速率限定了其在年夜规样子容貌天职析中的利用。间接进样质谱(DI-MS)尽管通量高,但面对着离子克制效应招致代谢物检测敏锐度下降、短少色谱拆散使得定性定量困难等挑战。是以,亟需倒退与DI-MS相配的高敏锐度质谱数据采集技术和数据阐发技术。
为此,科研职员提出一种基于纳升电喷雾间接进样高分辩质谱的非靶向代谢组学阐发战略:将一级准确质量、同位素散布形式、二级质谱类似度、母离子和子离子强度相关性等联合,使代谢物的定性精确率高于94%;定量方面采取一级母离子联合二级特征碎片离子的方式来完成。此办法稳定靠得住,2-3分钟可阐发一个样品,得当于年夜规样子容貌本的高通量代谢组学研讨。
此外,传统的细胞代谢组学阐发办法通常必要数百万个细胞,但许多稀有细胞如轮回肿瘤细胞、原代细胞、等,面对着细胞数不敷的成绩。科研职员在上述任务根底上,树立了基于毛细管微探针的细胞取样、96孔板脂质在线提取、nanoESI DI-HRMS拼接式质谱数据采集的新办法,完成了3分钟内从20个哺乳植物细胞中检测19类脂质、500多种脂质代谢物。该平台在性命迷信和临床医学研讨中具备利用后劲。
相关研讨结果别离以Strategy for Nontargeted Metabolomics Annotation and Quantitation Using a High-resolution Spectral-Stitching Nanoelectrospray Direct-Infusion Mass Spectrometry with Data-Independent Acquisition和Lipid Profiling of 20 Mammalian Cells by Capillary Microsampling Combined with High-Resolution Spectral Stitching Nanoelectrospray Ionization Direct-Infusion Mass Spectrometry为题,颁发在《阐发化学》(Analytical Chemistry)上。研讨任务获得国度重点研发筹划、国度自然迷信基金等的赞助。(100yiyao.com)
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