韩春雨要“昭雪”?最新研讨发现NgAgo具备DNA编纂才能 |
![]() |
起源:iNature 2021-09-07 08:28
原核 Argonautes (pAgos) 已被发起作为更机动的基因编纂对象,由于与风行的 CRISPR/Cas 体系分歧,它们不必要与其功效目的相邻的序列基序。来自嗜盐古菌 Natronobacterium gregoryi的一种有出路的 pAgo (NgAgo) 候选物始终是对于其在真核体系中后劲的争执的主题。普渡年夜学Kevin原核 Argonautes (pAgos) 已被发起作为更机动的基因编纂对象,由于与风行的 CRISPR/Cas 体系分歧,它们不必要与其功效目的相邻的序列基序。来自嗜盐古菌 Natronobacterium gregoryi的一种有出路的 pAgo (NgAgo) 候选物始终是对于其在真核体系中后劲的争执的主题。
普渡年夜学Kevin V Solomon团队在Nucleic Acids Research(IF=16.97) 在线颁发题为“NgAgo possesses guided DNA nicking activity ”的研讨论文,该研讨发现NgAgo 在非嗜盐宿主中表白欠安,即便在重折叠后,年夜多半卵白质仍不溶且无活性。然而,可溶性部门确切起到了切割 DNA 核酸内切酶的作用。NgAgo 与其他具备催化活性的 pAgo 共享规范域,但也包括曩昔无奈辨认的单链 DNA 联合域 (repA)。repA 和规范的 PIWI 构造域都参加了 NgAgo 的 DNA 切割运动。NgAgo 可以在年夜肠杆菌中和体外在指导序列 3"大众 末尾外 1 nt 处切割靶向 DNA。该研讨还发现,这些核酸内切酶活性关于年夜肠杆菌中加强的 NgAgo 领导的同源重组或基因编纂至关紧张。
总的来说,该研讨发现NgAgo 是一种新型 DNA 核酸内切酶,属于由特征 repA 构造域界说的未被辨认的 pAgo 类。NgAgo 使用 PIWI 中激进的和新的未表征的 repA 构造域来切割 DNA。NgAgo的这种切割介导原核生物中的基因编纂作用。该研讨任务树立了摸索 NgAgo 活性(以及其他 pAgo 的活性)的立异办法,并确定了将其倒退为下一代合成生物学对象的症结卵白质特征。
基因编纂是一种通过靶向修饰改革基因组的新技术。自发现以来,CRISPR/Cas9体系已成为基因组编纂库中最弱小的对象之一。虽然 CRISPR/Cas9 体系遭到研讨职员的欢送,但它也有其不欠缺之处。CRISPR/Cas9 体系对靶标辨认的几种中靶活性和 PAM 要求限定了其在某些基因组序列中的利用。是以,寻觅新的基因编纂办法仍旧是一个好的选择。除了 Cas9 卵白家族外,有研讨报道 Argonaute (Ago) 卵白家族,包含 TtAgo和 PfAgo,也具备一定的基因编纂才能。
在原核生物和真核生物中都发现了 Argonautes。在真核生物中,Argonaute 卵白是 RNA 诱导的缄默复合物 (RISC)的紧张构成部门。真核生物 Ago 卵白在 RNA 烦扰 (RNAi)、microRNA 和 piwi 互相作用 RNA (piRNA) 介导的转录后缄默中起着至关紧张的作用。一些原核 Ago 卵白,如 TtAgo 和 PfAgo,可以诱导外源基因在小烦扰核酸或领导 DNA (gDNA) 的指导降低解 。然而,TtAgo 和 PfAgo 通常在 65 °C 左右起作用,限定了它们在哺乳植物细胞中的利用。
2016年5月3日,韩春雨团队在Nature Biotechnology 在线颁发题为“DNA-guided genome editing using the Natronobacterium gregoryi Argonaute”的研讨论文,该研讨发现Natronobacterium gregoryi Argonaute(NgAgo)是一种DNA领导的核酸内切酶,实用于人类细胞的基因组编纂,这一会儿使NgAgo火遍环球,广阔研讨职员去验证其后果,很可怜,没有相关的团队能确定NgAgo有基因编纂的功效。随后引发普遍质疑,2017年8月3日,韩春雨撤回该论文。
不外,其他团队有另外的发现,南通年夜学刘东团队在Cell Research 颁发题为“NgAgo-based fabp11a gene knockdown causes eye developmental defects in zebrafish”的研讨论文,该研讨发现gDNA / NgAgo可以与靶基因联合以阻断其转录,同时该研讨也没有发现NgAgo具备基因编纂的才能。
该研讨从新表征NgAgo在原核生物中的功效。NgAgo 在非嗜盐宿主中表白欠安,即便在重折叠后,年夜多半卵白质仍不溶且无活性。然而,该研讨发现可溶性部门确切起到了切割 DNA 核酸内切酶的作用。NgAgo 与其他具备催化活性的 pAgo 共享规范域,但也包括曩昔无奈辨认的单链 DNA 联合域 (repA)。repA 和规范的 PIWI 构造域都参加了 NgAgo 的 DNA 切割运动。
NgAgo 可以在年夜肠杆菌中和体外在指导序列 3公众 末尾外 1 nt 处切割靶向 DNA。该研讨还发现,这些核酸内切酶活性关于年夜肠杆菌中加强的 NgAgo 领导的同源重组或基因编纂至关紧张。总的来说,该研讨成果证实了 NgAgo 在基因编纂方面的后劲,并为看似矛盾的申报提供了新的见解。(100yiyao.com)
医药网新闻
- 相关报道
-
- 民泰医药全面升级:2025年搬迁新址,打造中药智能化生产新标杆 (2025-07-11)
- 第一次为爱鼓掌要做好准备!快男备好爱廷玖盐酸达泊西汀 (2025-07-11)
- 《Science》刊发上海六院与复旦大学脑科学转化研究院联合成果:揭示造血干细胞移植治疗致死性遗传性脑白质病的有效性及其核心机制 (2025-07-11)
- 青海首批外乡产3D打印医疗东西获批上市 (2025-07-11)
- 全国药品运营监管任务会暨“清源”行为推动会召开 (2025-07-11)
- 软骨发育不全等86个常见病病种诊疗指南宣布 (2025-07-11)
- 700亿美元并购风暴,制药巨头狂砸CNS赛道的背后 (2025-07-11)
- 乳酸菌竟是心梗救治的隐形卫士?BMC Med研究揭秘:通过多重机制减轻心肌缺血再灌注损伤 (2025-07-11)
- 中国科学院发表最新Cell论文 (2025-07-11)
- 《自然》:“扭断”Tau纤维!UCLA团队发明可自组装短肽,与Tau纤维结合后会释放结构应力,让Tau纤维断裂成无毒碎片 (2025-07-11)
- 视频新闻
-
- 图片新闻
-
医药网免责声明:
- 本公司对医药网上刊登之所有信息不声明或保证其内容之正确性或可靠性;您于此接受并承认信赖任何信息所生之风险应自行承担。本公司,有权但无此义务,改善或更正所刊登信息任何部分之错误或疏失。
- 凡本网注明"来源:XXX(非医药网)"的作品,均转载自其它媒体,转载目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责。本网转载其他媒体之稿件,意在为公众提供免费服务。如稿件版权单位或个人不想在本网发布,可与本网联系,本网视情况可立即将其撤除。联系QQ:896150040