Nature Cell Biology: RNA |
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研究人员采用电泳实验(EMSA)来检测野生型和突变体RNA(kissing-loop的两个核苷酸替换为UU,破坏其序列特异性相互作用)的二聚化情况。实验表明,突变体RNA的二聚体形成显著减弱,表明该突变破坏了RNA二聚化的能力。而在果蝇卵母细胞中的smFISH(单分子荧光原位杂交)技术显示,突变体oskar mRNA分子错位定位,并且无法形成正常的颗粒结构,这表明RNA-RNA相互作用在颗粒形成中至关重要。
P-body(Processing body)是一种无膜细胞结构,由特定的RNA和蛋白质组成,通常在细胞应激状态下(如营养缺乏)形成。它们主要参与mRNA的降解、储存及翻译抑制,因此在调控基因表达方面起着重要作用【3】。研究P-body的形成机制可以帮助理解细胞如何在应激环境中维持RNA稳态以及调节mRNA的命运。在营养缺乏的条件下,野生型RNA能够形成特定的P-body,而突变体RNA无法形成这些颗粒,进一步证明RNA-RNA相互作用对颗粒组装和胚胎发育的关键作用。
图2:营养缺乏6小时后,野生型与突变体卵室中oskarmRNA(品红色)与P-body标记蛋白Me31B(绿色)共定位的情况(Credit:Nature Cell Biology)
综上所述,该研究深入揭示了oskar mRNA中的特定RNA-RNA相互作用在果蝇胚胎发育中的功能性和结构性角色。RNA的kissing-loop相互作用通过影响RNA聚合及蛋白质结合,直接调控了RNP颗粒的组装、RNA的定位及蛋白质的翻译调控。研究为理解RNA在无膜细胞结构形成及胚胎发育过程中的结构性作用提供了新的视角,并揭示了RNA自身在细胞功能中的多维度调控机制。
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