J NEUROINFLAMM:雷公藤红素通过间接联合HMGB1卵白在脑缺血再贯注中发扬神经维护作用

几个世纪以来，雷公藤(TwHF)相关的方子在我国普遍用于医治本身免疫性疾病、肿瘤和其他疾病，在从雷公藤中拆散出的泛滥生物活性身分中，雷公藤红素(cel)因其潜在的药用个性而遭到亲密存眷。

许多研讨标明，cel通过其抗氧化活性和神经炎症衰减才能在神经退行性疾病中具备神经维护作用，此外，cel通过匆匆进小胶质细胞/巨噬细胞M2极化，下降磷酸化c-Jun氨基末尾激酶(p-JNK)、磷酸化c-Jun(p-c-Jun)和核因子κB(NF-κB)的表白，以及克制高迁徙率族卵白B1(HMGB1)，显著地缓解长久性全脑缺血和永恒性脑缺血惹起的毁伤。(HMGB1)/NF-κB旌旗灯号通路在年夜鼠中表示出抗炎和抗氧化作用，然而，很少有研讨存眷确定cel是否对脑缺血再贯注(I/R)毁伤具备神经维护作用或确定其特同性联合卵白靶标。

图片起源：https://doi.org/10.1186/s12974-021-02216-w

神经炎症进程波及脑I/R毁伤多个阶段的病理心理学，靶向神经炎症始终是医治中风的无力的战略，对HMGB1（中风的症结匆匆炎警报素之一）在炎症相关疾病中的深化研讨曾经进行了多年。HMGB1被激活的免疫细胞转移到细胞质和细胞外空间或许被坏死或受损的细胞主动开释，因为分歧的翻译后修饰和激活的炎症免疫反馈，它显示出动静的氧化还原状态；在细胞外，HMGB1作为毁伤相关分子形式(DAMP)或警报通过受体介导炎症，包含早期糖基化终产品受体(RAGE)和Toll样受体2、4 (TLR2、TLR4)。该研讨在基于小分子化合物探针和化学标志的定量化学卵白质组学技术的帮忙下说明了细胞在脑I/R毁伤中的神经维护机制和靶点，并提醒cel间接联合HMGB1使其细胞因子活性失活，靶向热休克卵白70(HSP70)和NF-κB发扬抗炎活性。

Cel和cel-p在体表面现出类似的神经维护作用 图片起源：https://doi.org/10.1186/s12974-021-02216-w

Cel-p是合成的，在cel的羧基末尾带有一个炔基。研讨者起首在活的原代神经元中检测到cel和cel-p的细胞毒性，依据折半最年夜克制浓度(IC50)成果标明cel-p在生物活性方面与原始化合物十分类似(cel:IC50=2.06±0.52μM, cel-p:IC50=2.24±0.59μM)。关于细胞活气测定，原代神经元在96孔板中培育7人造后在糖氧褫夺(OGD)模子中培育，以评价cel和cel-p的神经维护作用，成果标明cel在原代神经元OGD模子中表示出显明的神经维护作用，cel的最佳剂量为0.1-0.8 μM，最佳给药光阴为OGD后即刻间断给药48h。在该模子中Cel-p显示出与cel类似的神经维护作用，标明cel在引入双正交反馈基团后保留了其生物活性。

Cel显著削减年夜脑中动脉灵通(MCAO)年夜鼠脑梗死体积，改善行动指标，加重尼氏(Nissl)染色毁伤 图片起源：https://doi.org/10.1186/s12974-021-02216-w

该研讨评价了cel是否对年夜鼠脑I/R毁伤表示入迷经维护作用，2, 3, 5-三苯基氯化四唑(TTC)染色和定量阐发成果标明，与模子组相比，cel和eda（依达拉奉，为自在基肃清剂）显著下降了梗死体积(p 0.001)。依据Zea-Longa评分成果发现，cel和eda在24 h、48 h和72 h的行动指标均有显著改善(p 0.001)，而模子组的神经功效未见显明改善，此外，Nissl染色成果标明，与模子组相比，cel和eda处置削减了MCAO年夜鼠皮质的病理变动。这些数据标明cel的神经维护作用在体内仿佛与eda类似。

Cel通过HSP70和人核转录因子肽(NF-κBp65)发扬神经维护作用 图片起源：https://doi.org/10.1186/s12974-021-02216-w

先前的研讨标明，cel诱导HSP70反馈并克制NF-κB活化以克制炎症反馈并调理后天免疫反馈。是以，研讨者树立了体外OGD模子和体内MCAO模子以模拟脑I/R毁伤，并测试细胞是否影响细胞质和细胞核中HMGB1的散布变动以及HSP70和NF-κBp65卵白的表白变动，成果标明模子和M+cel组细胞质中HMGB1的表白显著添加，而细胞核中HMGB1的表白显著下降，但整体HMGB1表白简直不受cel影响，这对OGD毁伤48h后HMGB1在细胞质和细胞核中的散布影响无限。相比之下，cel显著添加了HSP70的整体表白和核表白，并下降了NF-κB p65的整体表白和核表白，这与之前的研讨成果一致。研讨者发现免疫荧光(IF)成果与体外卵白质免疫印迹(WB)成果一致，而且在MCAO年夜鼠中也察看到相似的WB和IF成果，与模子组相比，cel(1 mg/kg)显著上调HSP70的表白，下调NF-κB p65的表白，对MCAO模子年夜鼠HMGB1的表白无影响。这些成果标明cel通过添加HSP70的表白和下降NF-κB p65的表白发扬神经维护作用。