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中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)周小龙团队在Nucleic Acids Research上在线发表题为 Activity reconstitution of Kre33 and Tan1 reveals a molecular ruler mechanism in eukaryotic tRNA acetylation 的研究论文,该研究成功重组了酵母Kre33和Tan1的ac4C12修饰活性。ac4C12的生物合成主要依赖于一个最小的元件集,包括一个典型的受体茎,11CCG13基序的存在和正确的D臂方向,这表明了一个分子标尺机制。
单个A13G突变赋予ac4C12对多个非底物tRNA的修饰。此外,将ac4C修饰引入到小RNA中,ac4C12修饰在体外和体内对tRNA的解链温度和氨酰化修饰的贡献很小。总之,该结果实现了体外活性重构,揭示了ac4C12生物合成的tRNA底物选择机制,并开发了一个有价值的制备乙酰化tRNA和非tRNA RNA物种的系统,这将促进乙酰化在RNA结构和功能中的功能解释。
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