研讨提醒N

Food Function （2021，12， 3393-3404）在线颁发上海交通年夜学农业与生物学院周选围传授课题组的研讨论文“N-Glycosylated Ganoderma lucidum immunomodulatory protein improved anti-inflammatory activity via inhibition of the p38 MAPK pathway”。本研讨提醒了通过N-糖基化修饰可能改善灵芝免疫调理卵白（FIP-glu）的生物学功效，为F在食物、药归天妆品和药物畛域的开辟利用奠基了根底。

灵芝 (Ganoderma spp.) 作为我国传统的食药用真菌，既是国度药典收载的药物、又是国度同意的新资本食物。灵芝中的真菌免疫调理卵白 (fungal immunomodulatory protein，F) 是此中紧张的生物活性物资，具备普遍的药用代价，如抗癌、抗过敏、抗免疫排挤、免疫调理等作用。生物体内的卵白质合成必要颠末多种翻译后修饰，如乙酰化、甲基化、泛素化、磷酸化、糖基化等；糖基化是此中一种紧张的翻译后修饰。研讨标明，具备分歧物理和生归天学性子的N-连贯聚糖可能影响着卵白质折叠，并赋予糖卵白多种功效。尽管糖基化可以影响乃至进步卵白质的活性，但它对灵芝免疫调理卵白 (fungal immunomodulatory protein from Ganoderma lucidum，FIP-glu或LZ-8) 的影响尚未见报道。

本研讨通过火析发现，在F的氨基酸序列中包括一个中度激进的潜在N-糖基化位点。通过定点渐变技术构建了三个渐变体，并应用毕赤表白体系表白了家养型FIP-glu基因及其渐变体基因（N31S、T36N和N31S/T36N），胜利得到了重组卵白FIP-glu以及渐变体卵白N31S、T36N和N31S/T36N。阐发标明rFIP-glu1 (rLZ-8) 分子在引入N-聚糖后变得加倍紧凑，N-糖基化修饰有助于维持 rFIP-glu1 (rLZ-8) 二级构造的稳定性和折叠。

经高碘酸-希夫试剂染色、PNGase F处置以及UPLC-qTOF-MS鉴定，发现FIP-glu和N31S为非糖卵白，T36N和N31S/T36N为N-糖基化修饰卵白。体外细胞毒性试验显示，T36N和N31S/T36N显着下降了对小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7的毒性，同时上调了IL-6和TGF-β1在mRNA程度的表白。进一步研讨标明N-糖基化修饰卵白下降了p38 MAPK磷酸化程度。

本研讨发现N-糖基化修饰的FIP-glu可能匆匆进其抗炎活性，该作用是通过克制p38 MAPK旌旗灯号转导通路完成的(100yiyao.com）