Science子刊：为肿瘤免疫疗法“保驾护航”，中美迷信家宣布最新癌症阻断结合疗法

如今，肿瘤免疫疗法已进入研讨暴发期，自从 ipilimumab 成为美国同意的第一款免疫查看点疗法（immune check-point blockade therapy，ICB therapy）用药后，免疫疗法的一年夜紧张分支 ICB疗法便进入了倒退黄金期，针对PD-1、PD-L1、CTLA-4等免疫查看点的克制剂迅速走入人们的视线，在医治、非小细胞肺癌、肾癌等方面获得了长足的提高，也为癌症患者们带来了新的愿望。

不外，值得注意的是，今朝研讨显示，在患有、非小细胞肺癌以及肾癌的患者中，仅有不到30%的人群可能通过这些克制剂获得优越的医治，而患有其他癌症的患者们则对ICB疗法无奈发生无效应对。迷信家们必需开拓新的思绪解决这一成绩，能力在攻克癌症难题上更上一层楼。

近日，来自中国迷信院、中山年夜学、哈佛医学院、塔夫茨年夜学、马里兰年夜学等高校的中美迷信家们，在 Science Tranlational Medicine 上结合颁发标题为“Reactivation of the tumor suppressor PTEN by mRNAnanoparticles enhances antitumor immunity in preclinical models”的研讨文章，研讨提出了为免疫疗法保驾护航的新偏向——通过脂质聚合颗粒将 PTEN mRNA递送进肿瘤细胞内，可以无效诱导细胞自噬，并通过开释毁伤相关形式分子（damage-associated molecular patterns，DAMPs）来触发细胞灭亡相关免疫的激活，从而提升ICB疗法的疗效。

研讨指出，PTEN基因是一种今朝被普遍研讨的肿瘤克制基因，它可能间接参加抗肿瘤免疫体系的调理。好多临床数据曾经标明，PTEN的缺失与部位T细胞浸润削减以及PD-1阻断医治的或耐药性显着相关。为探求此中的关系，研讨职员以PTEN缺失的前列腺癌细胞和PTEN变异的细胞为研讨工具，采取今朝炽热的mRNA技术和脂质聚合颗粒递送方式进行了体系研讨。

研讨职员起首开辟了一种脂质-聚合杂化颗粒（NP）平台，并对脂质纳米颗粒在PTEN mRNA 封装以及维持递送稳定性等多方面进行了严厉的验证，被封装好的 PTEN mRNA 被定名为mPTEN@NPs。

接上去就是实验阶段，研讨职员起首进行了体外实验，将样天职为4组，别离为节制组、未封装的PTEN mRNA、无PTEN mRNA的脂质纳米颗粒以及mPTEN@NPs，接着，采取卵白质印迹法（Western-blot）来确认PTEN的激活是否可能诱导肿瘤细胞的自噬。成果显示，mPTEN@NPs疗法的使用招致了自噬标记物LC3-II以及p62卵白的添加，这标明，mPTEN@NPs 可能诱导自噬体的造成，并可招致其在细胞内的积累。同时，实验验证了研讨职员对于PTEN可能诱发DAMPs开释的猜测，其成果标明，自噬体的积累也招致了DAMPs以及肿瘤抗原的开释与添加，从而惹起了细胞的免疫原性细胞灭亡（immunogenic cell death，ICD）。

荧光免疫测验法下的PTEN表白，从左至右别离为未进行医治的节制组、未进行封装的PTEN mRNA、无PTEN mRNA的脂质纳米颗粒、mPTEN@NPs

在体外实验取得了可喜停顿后，研讨职员又进行了小鼠体内实验。当小鼠体内的肿瘤细胞长到一定例模时，研讨职员将其分为3组，别离采取心理盐水、无PTEN mRNA的脂质纳米颗粒以及mPTEN@NPs进行打针医治，成果显示，与其他两组对照组相比，在采取了mPTEN@NPs进行医治的小鼠体内，其肿瘤内的CD3+CD8+ T细胞显着添加，同时，在肿瘤免疫体系中饰演紧张脚色的Treg和MDSCs细胞数目也出现回升趋向，而它们的添加，匆匆进了免疫克制肿瘤微情况的发生，这些试验征象都证实，mPTEN@NPs 可能触发抗肿瘤免疫的激活，并逆转免疫克制肿瘤微情况，从而诱发细胞的灭亡。

因为以往的研讨曾经证明，PTEN的缺失会招致抗PD-1靶向疗法的，是以，研讨职员在患有PTEN变异的小鼠体内进行实验，以探究PTEN的修复是否可能匆匆进抗肿瘤免疫体系的激活。患有的小鼠别离在第4天、第7天以落第10天采取心理盐水、无PTEN mRNA的脂质纳米颗粒以及mPTEN@NPs进行打针医治，同时，进行mPTEN@NPs医治的小鼠也将在第5天、第8天和第11天同时承受抗PD-1医治。

在颠末3轮医治后，mPTEN@NPs+anti-PD-1的结合疗法完成了更好的抗肿瘤疗效，这一疗法匆匆进了抗肿瘤免疫应对的添加以及免疫克制肿瘤微情况的改善，同时也加强了CD8 T细胞在组织内的浸透作用，而这些实验论断异样在PTEN缺失的前列腺癌小鼠模子中获得了证明。