《自然》子刊:科学家提出优化环状RNA翻译水平的新策略 |
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资料来源:科技部生物中心,2022-09-27 16:47
通过各种优化,本研究将CIRC RNA翻译的蛋白产量提高了数百倍,证实了工程化CIRC RNA在体内可以具有与线性mRNA相似强度的表达蛋白,且表达更稳定,翻译时间更长。
RNA(circRNA是一类特殊的非编码RNA分子,具有闭环结构,能更高效稳定地表达蛋白质。最近,斯坦福大学的研究团队开发了一种系统的方法,可以快速组装和测试影响合成CircrRNA蛋白质生产的因素,并通过优化设计将CircrRNA翻译表达的蛋白质产量提高了数百倍。相关成果发表在《Nature Biotechnology》上,论文题目是《工程环状RNA增强蛋白质生产》。
研究小组通过创建模块化高通量平台,制造并测试了合成的circRNA。为了提高circRNA的蛋白质翻译效率,研究团队优化了载体拓扑结构、5个非翻译区、3个非翻译区、内部核糖体进入位点和合成适体启动的翻译机制五个要素。通过优化组合这些元件,本研究成功将circRNA翻译的蛋白质产量提高了224倍,在体外比线性mRNA具有更高的翻译效率,在体内可以提供更持久的翻译。
研究人员已经产生了翻译起始和剪接之间具有不同长度框内间隔的circRNA变体。这些间隔区编码的肽反映了来自鼻病毒家族的共有病毒前导肽序列。测试这些circRNA的表达表明,增加间隔长度不利于翻译,核糖体不受td剪接二级结构的影响。
通过各种优化,本研究将circRNA翻译的蛋白产量提高了数百倍,证实了工程化circRNA在体内可以具有与线性mRNA相似强度的表达蛋白,且表达更稳定,翻译时间更长。该研究为今后的工业应用提供了新的思路和方法。
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