放疗后口腔鳞癌的“微小囊泡”藏抗瘤关键！Int J Radiat Biol揭示miR-198-5p/MYD88调控巨噬细胞新机制

放疗后口腔鳞癌的“微小囊泡”藏抗瘤关键！Int J Radiat Biol揭示miR-198-5p/MYD88调控巨噬细胞新机制

来源：100医药网 2025-09-22 16:00

本研究发现，辐射处理的口腔鳞状细胞癌细胞分泌的富含微小RNA-198-5p的细胞外囊泡，可通过靶向髓样分化因子88抑制巨噬细胞向M2型极化，为口腔鳞癌治疗提供新策略。

作为头颈部高发，其中口腔鳞状（OSCC）因侵袭性强、预后较差，成为临床治疗的重点难题。目前，肿瘤切除术后辅助放疗是OSCC的主要治疗方案之一，但放疗抵抗现象频发，严重制约治疗效果，如何提升放疗敏感性、改善肿瘤微环境，成为科研人员关注的核心方向。

近期，发表在Int J Radiat Biol的一项研究Extracellular vesicles derived from irradiated oral squamous cell carcinoma cells inhibits M2 macrophage polarization by the miR-198-5p/MYD88 axis，从放疗后释放的细胞外囊泡（EVs）入手，深入解析其对巨噬细胞极化的调控机制，为OSCC的治疗突破提供了全新思路。

研究首先针对辐射剂量进行优化，对SCC-9和Cal27两种OSCC细胞系施加0、2、4、8Gy的X射线照射，通过CCK8实验发现，4Gy与8Gy照射对细胞活力的抑制效果相近，且能有效诱导细胞响应，因此确定4Gy为后续实验的辐射剂量。随后，研究人员从辐射处理后的OSCC细胞上清中分离出EVs，经透射电子显微镜观察到直径80-150nm的囊泡结构，动态光散射分析显示其平均直径约114nm，Western blot进一步验证了EVs特异性标志物HSP70和CD63的阳性表达，证实了EVs的成功分离。更关键的是，通过RT-qPCR检测发现，与正常培养的OSCC细胞释放的EVs（NC-EVs）相比，辐射诱导的EVs（IR-EVs）中微小RNA-198-5p（miR-198-5p）的表达水平显著升高，提示该微小RNA可能在辐射调控EVs功能中发挥核心作用。

图1：电离辐射暴露后口腔鳞状细胞中微小RNA-198-5p的表达增加

为探究IR-EVs与巨噬细胞的相互作用，研究将THP-1细胞用PMA诱导分化为M0型巨噬细胞（光镜下可见细胞从悬浮小圆状变为贴壁大细胞，CD68阳性率从0.07%升至99.96%），并与荧光标记的EVs共培养。结果显示，巨噬细胞可有效摄取NC-EVs和IR-EVs，且经IR-EVs处理的巨噬细胞中，miR-198-5p的表达水平较NC-EVs处理组和对照组显著升高，明确了OSCC细胞可通过EVs将miR-198-5p传递至巨噬细胞内。

图2：口腔鳞状细胞癌细胞通过细胞外囊泡将微小RNA-198-5p传递给巨噬细胞

进一步研究IR-EVs对巨噬细胞极化的影响，流式细胞术结果显示，与NC-EVs相比，IR-EVs处理可显著上调巨噬细胞中M1型标志物CD86的表达，同时下调M2型标志物CD206的表达；荧光染色也观察到类似趋势；Western blot检测发现，IR-EVs处理组的M1型标志物CD80蛋白水平升高，而M2型标志物Arg-1、CD163的蛋白水平降低；ELISA检测细胞上清显示，IR-EVs可促进促炎细胞因子IL-12的分泌，抑制抗炎细胞因子IL-10的分泌。这些结果共同证实，IR-EVs能有效促进巨噬细胞向抗瘤的M1型极化，抑制促瘤的M2型极化。

图3：辐射诱导的细胞外囊泡促进巨噬细胞向M1型极化

为明确miR-198-5p调控巨噬细胞极化的分子靶点，研究通过TargetScanHuman 7.2数据库预测，发现髓样分化因子88（MYD88）可能是miR-198-5p的潜在靶标。双荧光素酶报告基因实验显示，转染miR-198-5p模拟物可显著降低含MYD88野生型3 UTR质粒的荧光素酶活性，而对突变型质粒无影响，证实miR-198-5p可直接结合MYD88的3 UTR。此外，向巨噬细胞转染miR-198-5p模拟物可降低MYD88的表达，转染抑制剂则升高MYD88的表达，进一步验证了miR-198-5p对MYD88的靶向抑制作用。

图4：髓样分化因子88是微小RNA-198-5p的潜在靶标

为验证MYD88在IR-EVs调控巨噬细胞极化中的作用，研究构建MYD88过表达质粒并转染巨噬细胞。结果显示，过表达MYD88后，即使经IR-EVs处理，巨噬细胞中IL-12的分泌量仍降低，IL-10的分泌量升高；流式细胞术显示CD86表达下调、CD206表达上调；Western blot显示CD80蛋白水平降低，Arg-1、CD163蛋白水平升高。这表明，过表达MYD88可逆转IR-EVs对巨噬细胞极化的调控作用，进一步证实IR-EVs通过miR-198-5p靶向抑制MYD88，从而调控巨噬细胞极化。

图5：髓样分化因子88过表达可逆转辐射诱导的细胞外囊泡介导的巨噬细胞M2型极化抑制

综上，这项研究系统揭示了放疗后OSCC细胞释放的EVs的关键作用：辐射诱导OSCC细胞分泌富含miR-198-5p的EVs，这些EVs被巨噬细胞摄取后，通过靶向抑制MYD88的表达，促进巨噬细胞向M1型极化、抑制M2型极化，从而改善肿瘤微环境的抗瘤免疫状态。这一发现不仅为理解放疗后肿瘤微环境的重塑机制提供了新视角，更提示将miR-198-5p封装进EVs可能成为OSCC的新型免疫治疗策略，为临床提升OSCC放疗效果、攻克放疗抵抗难题提供了重要的理论支撑和潜在靶点。（100yiyao.com）

参考文献：

Du X, Duan M, Zhang Y, Li R. Extracellular vesicles derived from irradiated oral squamous cell carcinoma cells inhibits M2 macrophage polarization by the miR-198-5p/MYD88 axis.Int J Radiat Biol. Published online September 16, 2025. doi:10.1080/09553002.2025.2498981

版权声明 本网站所有注明“来源：100医药网”或“来源：bioon”的文字、图片和音视频资料，版权均属于100医药网网站所有。非经授权，任何媒体、网站或个人不得转载，否则将追究法律责任。取得书面授权转载时，须注明“来源：100医药网”。其它来源的文章系转载文章，本网所有转载文章系出于传递更多信息之目的，转载内容不代表本站立场。不希望被转载的媒体或个人可与我们联系，我们将立即进行删除处理。

87%用户都在用100医药网APP 随时阅读、评论、分享交流 请扫描二维码下载->

医药网新闻