外泌体在肺癌中的研究进展

2.2外泌体参与免疫调节

大量研究表明，外泌体在抑制免疫反应或免疫逃逸过程中起到重要的作用。外泌体包含有一些肿瘤特异性抗原，这些特异性抗原通过激活抗原递呈细胞（APC）如树突状细胞（DC细胞），引起T细胞介导的抗肿瘤免疫反应。Huang SH等研究发现LCC-exosome携带的表皮生长因子受体（EGFR）可诱导产生免疫耐受性树突状细胞，进而生成特异性调节性T细胞（TREG），TREG具有抑制CD8+T细胞抗肿瘤功能，从而影响肺癌的发生发展。LCC-exosome分泌的miR-21和miR-29A，通过与Toll样受体（TLR）家族、TLR7和人类TLR8受体结合，触发TLR介导的NF-κB信号通路活化，最终导致肿瘤生长和转移。研究证实，外泌体中的配体如MICA、MICB等通过与NKG2D（MEMBERD）受体结合，使NKG2D受体表达下调，抑制淋巴细胞功能，最终导致肿瘤细胞的免疫逃逸。以上结果表明，LCC-exosome可介导免疫调节，参与免疫逃逸，促进肺癌的发生发展。

2.3外泌体参与放化疗抵抗

肿瘤化疗耐药和放疗耐受及抵抗是导致肿瘤侵袭、转移和复发的重要原因。研究表明，LCC-exosome在肺癌放化疗抵抗过程中发挥着重要功能。Xiao X等研究发现当肺癌A549细胞暴露于顺铂（DDP）后，外泌体分泌水平升高，A549细胞释放的外泌体降低了其他A549细胞对顺铂的敏感性，同时其他A549细胞分泌的外泌体增加了A549细胞对顺铂的抗性。Qin X等研究发现肺癌细胞中提取的外泌体使顺铂对其他癌细胞具有抗性，A549细胞外泌体分泌的miR-100-5P的下调被证实参与了顺铂的抵抗。研究还发现使用吉非替尼处理过的PC9人肺癌细胞系所产生的外泌体降低了顺铂的抗作用。此外，Tang Ｙ等研究发现肺癌患者接受60Gy放射治疗后含miR-208A的外泌体表达水平升高，进一步激活PI3K/AKT/mTOR信号通路，最终导致肺癌放疗抵抗。以上研究表明，外泌体及其分泌的蛋白质、miRNA通过不同途径影响着放化疗疗效。

外泌体在肺癌中的作用

随着对肺癌诊断方法研究的深入，目前国内外正在广泛研究血清生物学标志物联合低剂量螺旋CT（LDCT）的肺癌诊断策略，通过血清生物学标志物筛查肺癌是目前研究的热点和趋势。研究表明，外泌体分泌的miRNA和蛋白质可作为肺癌临床应用中较理想的新的生物学诊断标志物。Giallobardo M等利用定量聚合酶链反应（qPCR）分析NSCLC患者血液中提取的外泌体所分泌的8个miRNA（miR-30B、-30C、103、-122、-195、-203、-221和-222）均与NSCLC相关；Cazzoli R等采用qPCR研究发现肺腺癌患者血液提取的外泌体所携带的4种miRNA（hsa-miR-378A、-379、-139-5P和-200B-5P）较健康吸烟者表达水平高，6种miRNA（hsa-miR-151A-5P、-30A-3P、-200B-5P、-629、-100和-154-3P）在肺腺癌中表达水平明显高于肺肉芽肿患者；Rodriguez M等研究发现肺癌患者血液中外泌体含有的miR-122-5P表达量高于支气管肺泡灌洗液（BALF）所分离的量。Vanni I等研究发现肺癌患者血液外泌体来源的miR-25和miR-223的表达水平较正常人升高，而let-7F、miR-20B和miR-30E-3P的表达水平前者较后者明显降低，这种差异性表达为肺癌的诊断带来潜在应用价值。此外，外泌体蛋白质也可以作为肺癌标志物。Huang SH等研究发现从NSCLC患者组织提取分离的外泌体蛋白质中约80%含有EGFR，在肺部慢性炎症患者中只有约2%的外泌体蛋白含有EGFR；另一项研究采用EV阵列分析法研究表明外泌体蛋白可作为晚期NSCLC的潜在诊断标志物。通过免疫印迹和免疫组织化学法研究发现肺癌患者尿液来源的外泌体中的人富亮氨酸α2糖蛋白1（LRG1）是NSCLC非侵入性诊断的候选生物学标志物。Ueda K等通过对1369个外泌体蛋白进行质谱定量分析，发现CD91可作为鉴别肺腺癌特异抗原的外泌体，CD91联合癌胚抗原（CEA）可作为肺癌诊断标志物，两者联合检测的灵敏度和特异度均高于单独检测CEA。以上研究表明，外泌体的相关miRNA和蛋白质检测将为肺癌患者的早期发现、早期提供更可靠的依据。

外泌体在肺癌治疗及预后评估中的作用

大量研究已经证明外泌体的相关研究对肺癌的治疗起着重要的作用。目前存在四种潜在的治疗策略：①抑制外泌体的产生或分泌，降低外泌体含量。MARLEAｕAM等利用一种AETHLONADPT血浆置换技术，将含有外泌体的血液过滤，发现针对性减少外泌体的含量可能成为治疗肺癌新技术；②外泌体可作为抗肿瘤疫苗。研究表明DC细胞来源的外泌体（DEX）可激活CD4+和CD8+T淋巴细胞产生抗肿瘤作用。因此，外泌体可作为疫苗用于肺癌的治疗新手段。研究发现在晚期NSCLC患者中，DEX疫苗是可行的，其治疗耐受性良好。脂质体疫苗BLP-25、TG4010等可能在肺癌免疫治疗中起作用，需进一步进行实验验证。BESSEB等采用DEX疫苗治疗NSCLC患者进行Ⅱ期，证实了在晚期NSCLC患者中，DEX能够增强自然杀伤细胞（NK）的抗肿瘤作用；③外泌体可作为药物传送。外泌体膜与亲本细胞膜的组成相近，可直接与靶细胞膜融合，同时具有稳定性、细胞靶向性，可作为药物传送的理想颗粒。Aqil F等将组装的南蛇藤素-外泌体复合体（EXO-CEL）在A549和H1299肺癌细胞系中进行体外实验发现外泌体复合物抗肿瘤效果较好。通过实验组装形成的外泌体-紫衫醇复合物药效高于单独应用paclitaxel；④外泌体可作为肺癌治疗新靶点。研究发现外泌体let-7的表达水平与肺癌的发生发展具有显着的相关性，提示外泌体let-7可作为肺癌治疗的新靶点。此外，研究表明外泌体在肺癌的治疗中具有潜在的预后评估价值。Munagala R等通过检测小鼠肺癌模型中和血清外泌体的miRNA在原发和复发性肺癌中的表达水平变化，发现复发性肺癌中外泌体miR-21和miR-155显着升高，证明这两种外泌体miRNA的表达水平与肺癌复发风险具有一定的相关性。研究还发现外泌体miR-29A-3P和miR-150-5P的表达水平具有预测肺癌放疗相关毒性的价值。