Cell：我国科学家开发出一种针对包括新冠病毒在内的β冠状病毒的通用疫苗设计策略

结构指导下的抗原设计是快速、精确制造疫苗的重要工具。全长S蛋白是作为CoV抗原亚单位疫苗的另一种常见的选择。全长三聚体S蛋白通常具有很高的免疫原性，原因很可能是它具有较大的尺寸（大约600kDa）。它不仅包含RBD，即强效中和抗体的主要靶点，还包含也能诱导中和抗体或保护性抗体的非RBD区域，比如N端结构域。人们之前已报道了一种通过基于结构的抗原设计来让MERS-CoV S蛋白融合前构象保持稳定从而提高基于全长S蛋白的CoV疫苗疗效的通用策略。然而，由于已报道针对CoV免疫反应的抗体依赖性增强（ADE）现象，人们寻求最小化的有效免疫原。另外，CoV S蛋白的RBD已被认为是一个有吸引力的疫苗靶点，这是因为它在免疫聚焦（immune focusing）方面具有优势，但可能需要有效的佐剂和多剂量来产生足够的免疫原性。

这些研究人员将这种二硫键连接的RBD二聚体鉴定为免疫原：与常规的RBD单体相比，它的免疫原性显著提高，这一点通过中和抗体滴度来证实。通过结构引导设计，这种RBD二聚体经过进一步改造后成为串联重复sc-二聚体，这可以成为β-CoV疫苗设计的一种通用策略。事实上，利用RBD-sc-二聚体对小鼠进行两次免疫足以使所有针对MERS、COVID-19和SARS的测试疫苗获得高水平的抗体反应。据此，将采用两剂疫苗接种方案来评估基于RBD-sc-二聚体的CoV疫苗在动物模型和人体中的保护效果。值得注意的是，在三次免疫后， RBD单体的免疫原性与两次接种sc-二聚体疫苗相似。特别是对于SARS-CoV疫苗，RBD-sc-二聚体在三次免疫后仅表现出略高的抗体反应（** P 0.01）和中和抗体滴度（* P 0.05）。

RBD-sc-二聚体免疫原性增强的原因是：(i)抗原分子量从约30kDa翻倍到约60kDa；(ii)双RBM，即这种二聚体双价地发挥作用，这可能使B细胞中的B细胞受体交联，以获得更好的刺激；(iii)RBD的二聚体界面上的非RBM表位可能被阻塞，以进一步提高免疫聚焦；(iv) 优势免疫表位的暴露。

总之，这些研究人员提供了一种通用的策略来设计β-CoV疫苗，并在针对MERS、COVID-19和SARS的疫苗开发中证实了这个概念。由此产生的免疫原可应用于其他表达系统，如、昆虫细胞，也可应用于其他疫苗平台，如DNA、信使RNA和疫苗。经过改造的RBD-sc-二聚体不引入任何外源序列，从而突显了这种基于RBD-sc-二聚体的CoV疫苗临床开发的可行性。这项研究中描述的COVID-19和MERS候选疫苗有希望从实验台进一步进展到临床。g/L水平的抗原产量突出了扩大生产能力，以便满足全球的迫切需求，特别是针对大流行性COVID-19的需求。

这项研究存在的局限性

众所周知，CoV RBD是中和抗体干扰病毒受体结合的主要靶点，这些研究人员关注的是基于RBD的疫苗所诱导的体液反应。还应进行扩展研究，比如被动转移实验，以进一步证实这种体液反应是否足以抵御CoV的挑战，尽管他们近期的研究工作通过使用人源单克隆抗体证实了被动保护的存在。另外，虽然在重组蛋白型疫苗的研究中，磷酸盐缓冲液（PBS）和PBS加佐剂都被广泛用作安慰剂，但使用给予无关蛋白加佐剂的对照组将是一种更好的阴性对照选择。（100医药网 100yiyao.com）