研究人员开发酮类物质高通量筛选新方法

酮是有机化学和生物催化的基础化合物，也是药物和食品等高值化学品的重要砌块。酮相比醛具有更大的惰性，适用于醛的显示方法，往往不能适用于酮。目前报道的酮检测方法普遍存在灵敏度低、底物谱窄、检测环境受限等制约因素，因此，发展更具广谱性和通用性的酮类物质高通量筛选方法十分重要。

中国科学院天津研究所研究员孙周通带领的酶分子工程与工业生物催化研究团队，围绕这一技术问题，通过显色剂筛选，建立了一种新的酮类物质的高通量检测方法。通过使用荧光染料对甲氧基-2-氨基苄胺肟（PMA）可以快速测定多种结构的酮类化合物。该检测方法具有灵敏度高（μM级别）、拟合度强（R2 0.9）、底物谱广（可检测四大类20余种酮类物质）、背景噪音低、显色稳定等优点，且可以用于全细胞或体外酶催化体系。将该高通量显示方法用于基于酮类还原和氧化反应的新酶挖掘与定向进化筛选，获得新的醇脱氢酶和催化活力提升的突变体。该研究开发的基于PMA的荧光筛选方法可以适用于酮类物质的微孔板筛选，为基于酮类物质的新型生物催化剂的发现和改造提供了通用的高通量筛选手段，提高了筛选效率。(100yiyao.com）