研讨人员完成今朝最长线性聚糖—128聚糖的化学全分解 |
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细菌外表的脂多糖(简称LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分,其多糖年夜都具有引诱炎症的效应,是细菌内毒素的次要成分。近年来,意年夜利迷信家Molinaro等人经过研讨在欧丽人群中罕见的一种肠道共生菌——通俗拟杆菌(Bacteroides vulgatus mpk),发明该拟杆菌外表的脂多糖起到调理小鼠免疫反响的感化,使得小鼠具有预防炎症性肠病的才能。这一发明与平日以为的外表脂多糖的功效截然相反。该通俗拟杆菌的脂多糖O-抗原具有共同的[→4)-α-鼠李糖-(1→3)-β-甘露糖-(1→]二糖反复单位,该糖链构造及其失常的生物学功效有利于该糖链的化学分解;经过全分解取得该类聚糖有助于深化研讨其功效,推进研发响应难治性肠炎药物。
中国迷信院上海无机化学研讨所性命无机化学国度重点试验室俞飚课题组展开对该拟杆菌脂多糖O-抗原糖链的化学分解研讨。研讨人员在二糖程度上处理了难以构建的β-D-甘露糖苷键的分解成绩,开辟了可制备的正交维护的二糖砌块的办法;把该二糖砌块制备成给体和受体,经过较轻易掌握的α-鼠李糖糖苷化反响获得四糖;经过[2n + 2n]迭代组装获得全维护的8糖、16糖、32糖、64糖和128糖。个中,为完成对[2n + 2n]的糖苷化衔接,研讨人员应用其成长的一价金催化的“俞氏”糖苷化反响(Yu Glycosylation),该反响的给体易制备、性质波动、活化前提平和,是完成该多糖分解的症结之一;另一症结是多糖维护基的脱除。128糖的分解进程中,触及到258个维护基的脱除、322个碳-氧键的断裂,多糖底物的消融性会随反响停止而产生变更,是以,维护基的完整脱除具有挑衅。经过探索和把控反响前提,研讨人员取得高纯度的目的多糖化合物,个中,128糖是采取化学办法分解出的线性最长的聚糖分子。
科研人员采取多糖剖析技巧对该128糖停止构造判定。意年夜利那不勒斯菲里德里克第二年夜学博士Silipo应用二维分散排序核磁共振谱(2D DOSY)验证64糖的分子量;经过核磁共振试验和盘算模仿等手腕肯定该系列多糖在溶液中的线性延展构象。128糖的精确分子量(Mw = 19748)由荷兰莱顿年夜学博士Nicolardi应用基质帮助激光解吸离子化-傅立叶变换离子盘旋共振质谱(MALDI FT-ICR MS)肯定。阿姆斯特丹沾染和免疫研讨所博士Chiodo对该系列多糖与免疫相干的人源凝聚素的辨认停止挑选,发明该系列多糖可以选择性辨认树突状细胞外表C-性凝聚素DC-SIGN,这为对该拟杆菌脂多糖的后续生物学和药理学研讨供给线索。(100yiyao.com)
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