中间体复制肇端调控研讨取得新停顿

北京年夜学性命迷信学院张传茂传授试验室在国内出名杂志Journal of Cell Biology以长文模式在线颁发了题为“PLK4-phosphorylated NEDD1 facilitates cartwheel assembly and centriole biogenesis initiations”的研讨论文。该项任务发现，中间粒外周基质卵白（PCM）的组分之一NEDD1关于车轮构造拆卸和中间粒产生的肇端至关紧张，而且这个进程遭到了PLK4激酶的磷酸化调控，该项任务明白了车轮构造拆卸肇端的准确地位并说明了其详细的调控机制。

中间体是普遍存在于真核细胞中具备致密构造的细胞器，它是细胞内最年夜的微管组织中间，介导双击纺锤体的树立并确保物资的均匀分派。中间体是由两个中间粒以及包裹在外周的中间粒外周基质（PCM）构成。跟着超高分辩率显微镜技术的倒退，通过免疫荧光标志PCM卵白组分，人们发现中间粒外周基质在母中间粒外周的分列是有序的，即由外向外呈齐心圆方式盘绕在中间粒外周。然而间期这么高度有序分列的中间粒外周基质PCM与中间体复制肇端的关系尚不分明；车轮构造的拆卸代表新中间粒造成的第一步，车轮构造组装和原中间粒的产生是若何肇端的以及肇端地位在哪里，都有待研讨。

在本项任务中，该团队发现NEDD1卵白的缺失重大毁坏了车轮构造拆卸和子中间粒产生的肇端。在正常环境下，PCM的分层构造是遭到严厉调控的，PCM卵白被次序招募到中间体上，Cep192呈环状散布，PCNT呈喷射状散布，它们两个协同招募了NEDD1以环状的模式定位在中间体上，从而使NEDD1可以与PLK4在G1期共定位，而NEDD1卵白招募了γ-TuRC到PCM上。进一步地，通过超高分辩率显微镜察看发现NEDD1作为一个基座协助肇端了车轮构造的拆卸和子中间粒的产生。

通过免疫荧光，免疫共积淀和体外卵白质联合试验标明，NEDD1与车轮构造的焦点组分SAS-6之间存在间接的互相作用。而且二者的互相作用遭到了细胞周期的调控，二者联合的时期也恰恰是中间体复制肇端产生的时期，即S期晚期，从而证明了NEDD1可以通过将SAS-6间接招募到中间体下去肇端车轮构造的拆卸。

进一步地，该团队发现NEDD1协助肇端车轮构造拆卸的进程遭到了PLK4激酶的磷酸化调控。进入S期后，PLK4 激酶的活化，使NEDD1在S325位点产生了磷酸化从而使车轮构造的拆卸可以在NEDD1这一层上肇端，详细进程是磷酸化的NEDD1与γ-TuRC的联合削弱，而与SAS-6产生互相作用将SAS-6招募到中间体上，与STIL卵白一路拆卸车轮构造。跟着细胞周期的进行，PLK4激酶活性削弱，NEDD1与γ-TuRC的互相作用加强，使NEDD1可以联合更多的γ-TuRC组分来成核中间粒微管，从而肇端子中间粒的造成。而要是惹起NEDD1的适度磷酸化，会使过多的SAS-6被招募到中间体而招致中间粒的适度扩增，乃至惹起多级纺锤体的发生进而招致染色体拆散异常。综上所述，该项任务说明了NEDD1协助肇端车轮构造拆卸和中间粒产生的详细机制，为懂得中间体轮回与细胞周期调控相偶联的潜在机制提供了紧张信息。(100yiyao.com）