Nature子刊：松懈素基因疗法无望为肝软化患者带来新愿望

肝软化（早期肝纤维化）是慢性肝脏疾病倒退至早期的独特终局，是肝脏相关灭亡的次要起因。据统计，环球每年死于肝软化的人数高达100多万。在中国，肝软化的次要病因是慢性乙型肝炎，近年来酒精性及非酒精性脂肪性肝病所致肝软化比例也逐步添加。虽然现代医药技术突飞大进，但今朝尚无可以治愈肝软化的药物，肝脏移植是医治早期肝软化的独一路径。然而，安康肝脏供给却重大充足。寻觅肝软化新疗法火烧眉毛。

2021年1月25日，北卡罗来纳年夜学教堂山分校的黄力夫（Leaf Huang）传授团队在《Nature Nanotechnology》宣布了一项题为Hepatic macrophages act as a central hub for relaxin-mediated alleviation of liver fibrosis的研讨，应用脂质粒搭载编码松懈素（relaxin，RLN）的质粒DNA以及巨大RNA-30a-5p（miR-30a-5p），特同性靶向肝星状细胞（激活的肝星状细胞（activated hepatic stellate cell，aHSC）是形成肝纤维化的次要序言细胞），在多种小鼠肝纤维化模子中无效遏制并逆转了纤维化倒退，为肝软化医治带来曙光。

RLN是20世纪初发现的在孕期临蓐前年夜量排泄的对产道有松懈作用的多肽类激素。近年来，迷信家发现RLN受体（RXFP1）在其他多种器官中均有表白，RLN与RXFP1联合可在这些组织器官内起到扩张血管、诱导细胞外基质降解以及逆转成纤维细胞激活的作用，从而克制纤维化倒退。然而，RLN的血液轮回半衰期极短（约10分钟），经静脉打针后少少能达到靶器官发扬药效。

为解决此窘境，研讨职员将编码RLN的质粒DNA（pRLN）包载入脂质粒中，应用脂质粒自发富集于肝脏的性子将静脉打针后的基因药物递送至病变肝脏，试验成果证实，纤维化的小鼠肝脏胜利化身“生物工场”，经pRLN转染后表白年夜量RLN，且该表白仅限于病变肝脏，而不涉及其他紧张器官。在小鼠肝纤维化模子中，RLN基因疗法显着下降了HSC的激活及肝脏内胶原卵白堆积。

pRLN选择性表白于纤维化肝脏

RLN显着下降纤维化肝脏中HSC的激活以及胶原堆积

研讨职员不仅证明了RLN对肝软化医治的无效性，更提出了巨噬细胞（Macrophage，MΦ）对RLN诱导肝星状细胞去激活起决议性作用。

论文的第一作者胡梦莹博士说：“aHSC年夜幅上调RXFP1早有报道，是以咱们后来假如转录发生的RLN可能间接与aHSC外表的RXFP1联合，使其复原至静息态。然而在理论操作中，却发现RLN体外处置aHSC对其表型没有影响。这种体表里成果的纷歧致性暗示RLN是直接影响aHSC，且这种影响很年夜概率是由aHSC周边情况介导的，之后咱们发现纤维化肝脏中80-90%的MΦ表白RXFP1。”

肝MΦ对肝毁伤的迅速应对起至关紧张的作用。当肝脏受损时，Kupffer Cell（组织驻留型MΦ）会开释趋化因子（如CCL2，CCL5）从外周血招募年夜量轮回单核细胞入肝，并诱导其分解为匆匆炎型MΦ，从而激活HSC，招致肝炎、肝纤维化加剧。

现实上，今朝年夜量抗肝纤维化研讨专一于开辟CCL2/CCL5阻断剂，从而克制单核细胞衍生的MΦ凑集至肝脏。然而，单核细胞衍生的匆匆炎型MΦ可进一步在特定情况旌旗灯号诱导下极化得到抗纤维化表型，起克制炎症和降解细胞外基质的作用，从而匆匆进组织修复。是以，单纯阻断外周轮回单核细胞衍生的MΦ招募也堵截了此类“修复性MΦ”的泉源，能够招致无奈真正治愈肝软化。

这项新研讨反其道而行之，初次发现RLN匆匆进了CCL2/CCL5的开释，招募更多的单核细胞衍生的MΦ进入纤维化肝脏；同时，表白发生的RLN作用于这些MΦ匆匆进其表型由匆匆炎型向修复型转换。

除了指出RLN诱导MΦ表型极化，研讨团队还发现经RLN刺激后的MΦ开释外泌体从而诱导aHSC复原至静息态。

通过高通量测序挑选MΦ外泌体内具备差别表白的巨大RNA，研讨职员发现miR-30a-5p在RLN刺激后的MΦ发生的外泌体内表白升高，aHSC摄取miR-30a-5p后下调ASK1激酶，从新开释调理HSC激活态的PPAR-γ核受体，终极诱导aHSC去激活。依据这一新发现，研讨团队设计了pRLN+miR-30a-5p结合基因疗法，在四氯化碳诱导的肝纤维化模子以及非酒精性脂肪肝炎模子中证明协同克制炎症倒退，逆转肝纤维化。

pRLN+miR-30a-5p结合基因疗法协同逆转肝纤维化

论文通信作者黄力夫传授表现：“这是一篇非典型的Nature Nanotechnology文章，由于咱们用来递送基因药物的脂质纳米粒已有十多年汗青，这篇文章的亮点在于发现了一种新的抗纤维化生物机制。但值得注意的是，咱们的一切发现始于体表里松懈素药效的差别性，要是没有递送基因药物，咱们并不会发现松懈素显着的抗纤维化后果，也就不会有接上来的故事。”