PNAS：高分辩率质谱阐发法提醒遗传异质性肥厚型心肌病

HCM中cTnI和ENH2磷酸化的协同降低

除了ENH2之外，作者还发现了另一个紧张的Z盘卵白cypher。Cypher由LDB3基因编码，在横纹肌组织中表白，具备许多剪接异构体。作者检测到两种异构体的多个磷酸化物种。在正常和HCM组织中均察看到单磷酸化和双磷酸化的cypher-5（pcypher-5和pcypher-5），而HCM组织也表示出三磷酸化和四磷酸化的卵白质模式（3pcypher-5和4pcypher-5）。与HCM组织中cypher-5磷酸化显明添加相反，HCM组织中cypher-6磷酸化仿佛削减。鉴于之前没有检测到完全的内源性cypher-5和cypher-6，作者接上去使用超高分辩率傅里叶变换离子盘旋共振（FTICR）MS/MS阐发确定了这些亚型的序列，得到cypher两个亚型N端和C真个间接序列证据。作者通过联合ECD和碰撞活化离解（CAD）试验察看到与未磷酸化cypher-5的117/348卵白质骨架键裂解绝对应的片断，序列笼罩率为34%。通过ECD和CAD结合试验，得到了57%的未磷酸化CYPHR-6的序列笼罩率，占肇端剂甲氧九裂解和N端乙酰化DNA预测序列的160/281卵白骨架裂解。

HCM Cypher卵白磷酸化特征

综上所述，该研讨采取了一种基于LC-MS的办法，从HCM和正常心脏组织中鉴定和定量心肌肌节卵白组。作者提醒了一个简单的卵白组构造，并解析了紧张Z盘卵白的卵白质组。阐发显示HCM心肌组织中肌节卵白与正常组织的的磷酸化差别。HCM组织cTnI和ENH2磷酸化下降与正常组织的磷酸化水平呈较强的线性相关，提示HCM中PKA旌旗灯号的调理失调，肌丝与Z盘卵白PTM的互相作用不正常。必要注意的是，该研讨存在一定局限性，行列步队只包括部门HCM基因渐变（MYH7或MYBPC3），并没有席卷一切基因渐变的HCM患者。另外，作者只取材了早期流出道重大梗阻患者的心肌组织，并不克不及很好的反映晚期HCM的肌节卵白模式。虽然MYH7或MYBPC3中存在分歧的肌节基因渐变，但汇聚路径仍能激活，从而招致壅闭性HCM患者肌节卵白组形状与相似临床表型一致的改动。作者强调了HCM在卵白质组程度上的分子表征关于相识表型表示和潜在的功效失调旌旗灯号通路的紧张性，将来的卵白质组学研讨将涵盖普遍的HCM表型，有助于依据卵白质组的形状来界说疾病停顿和预后。（100医药网100yiyao.com）

原始出处：

1、Tucholski, Trisha et al. “Distinct hypertrophic cardiomyopathy genotypes result in convergent sarcomeric proteoform profiles revealed by top-down proteomics.” Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America vol. 117,40 (2020): 24691-24700. doi:10.1073/pnas.2006764117；

2、Zhan, Ren-Zhi et al. “Loss of sarcomeric proteins via upregulation of JAK/STAT signaling underlies interferon-γ-induced contractile deficit in engineered human myocardium.” Acta biomaterialia vol. 126 (2021): 144-153. doi:10.1016/j.actbio.2021.03.007；

3、Greenberg, Michael J, and Jil C Tardiff. “Complexity in genetic cardiomyopathies and new roaches for mechanism-based precision medicine.” The Journal of general physiology vol. 153,3 (2021): e202012662. doi:10.1085/jgp.202012662