研讨发现miR

MicroRNA在神经体系发育和功效调理中发扬侧重要作用，是其正常运行不行或缺的一部门。此中miR-218，作为一个在中枢神经体系中普遍表白的，被发当初阿兹海默症、精力决裂症和等多种神经退行性疾病和神经精力疾病中呈现表白异常。在这些疾病中，患者的认知功效具备分歧水平的缺点。然而，对于miR-218在这些疾病中饰演何种脚色今朝仍不得而知。

在本研讨中，作者通过CRISPR/Cas9技术构建miR-218-1和miR-218-2基因敲除小鼠，提醒了miR-218在年夜脑中普遍表白，尤其是在海马中表白程度最高；而敲除miR-218-2基因后，miR-218在海马中表白程度显着降低。随后，通过前提恐怖试验、水迷宫和T迷宫行动学测试发现，miR-218-2基因敲除小鼠的认知才能呈现显明缺点。此外，在小鼠海马区通过病毒打针过表白miR-218则会使小鼠在行动学测试中展示出加强的认知功效。

为搞清miR-218-2基因敲除小鼠认知缺点的分子机制，作者应用全细胞膜片钳技术、高尔基染色和冷冻电镜技术阐发miR-218-2基因敲除神经元的发育、形状和电心理特征，发现miR-218-2敲除的海马神经元复兴奋性突触的突触囊泡开释削减，作为培训影象分子根底的永劫程加强（LTP）削弱；miR-218-2缺失色经元的树突总长度和分支数削减，突触密度回升；而且，电镜阐发成果显示，miR-218-2敲除神经元中突触囊泡的转运散布呈现缺点。此外，过表白miR-218则会招致相反的神经元表型。

进一步，作者联合RNAseq和miR-218靶基因预测数据并进行KEGG阐发，挑选出能够的miR-218靶基因。应用qRT-PCR和双荧光素酶申报基因阐发，确认了补体因子C3、Mmp13和Gdnf这三个基由于miR-218候选靶基因。经电心理试验验证，发现只有C3敲低的神经元表型与miR-218过表白神经元完整一致。间接使用C3卵白多肽处置家养型小鼠可以模拟miR-218-2基因敲除小鼠的行动和细胞表型，而使用C3a受体拮抗剂SB290157处置miR-218-2基因敲除小鼠则可以抢救miR-218-2基因敲除小鼠的突触功效和认知缺点。是以，作者得出论断，补体因子C3是miR-218调理突触功效的次要靶基因。

综上所述，miR-218-2基因在小鼠海马中通过靶基因C3调理神经元的形状和突触囊泡的转运与开释，进而影响神经元的突触可逆性和LTP的产生，终极影响小鼠的认知功效。该研讨提醒了的神经退行性疾病和神经精力疾病能够通过共通的miR-218相关机制发生认知阻碍，为后续的疾病认知缺点的医治提供了新的思绪和偏向。(100yiyao.com）