Nature: 克制TMEM16可无效阻断SARS

2021年4月12日讯/100医药网BIOON/---COVID-19疫情自暴发以来，仍然重大影响着咱们的生存，是以，对COVID19的疾病产生机理的研讨以及相关药物的开辟有助于缓解疫情，从而有助于使咱们的生存尽快复原正常。此前研讨曾经标明：COVID19是一种具备共同特征的疾病，包含肺血栓造成，频仍腹泻，炎症反馈异常激活和肺泡水肿，肺功效疾速好转等。然而这些征象背地的病理根底仍旧难以捉摸。

(图片起源：www.nature.com) 在比来颁发在《Nature》杂志上的一项研讨中，英国伦敦国王学院的Mauro Giacca团队对COVID-19患者的肺中遭到感化的肺细胞进行了形状特征的阐发，发现其形状异常且常常呈现多核征象。这些合胞体的发生是因为SARS-CoV-2 Spike卵白对受体细胞的刺激所致。基于这些察看成果，作者对超过3000种已同意的药物进行了两次高倍镜检，以寻觅克制Spike招致的合胞体发生的克制剂。作者集中鉴定了克制Spike介导的细胞交融的83种药物，而且将注意力集中在可以避免病毒复制和相关细胞病变的无效药物上。

起首，作者在意年夜利的里雅斯特的年夜学病院查看了2020年3月至5月时代间断41例死于COVID-19的患者的器官。 除了漫溢性的肺泡毁伤，频仍的血栓造成和普遍的纤维化外，这些患者中的近90％还发现了一种特别的病变，即具备合胞体特征的非典型细胞，此中含有年夜量多核细胞，细胞核数目从2到20以上。 这些合胞体细胞年夜多半是真正的肺炎细胞，由于它们表白了两种肺炎细胞特同性标记物（naspin和surfactant B）。原位杂交试验显示这些细胞呈病毒RNA阳性。

（图1，高通量挑选提醒可能克制SARS-CoV-2感化引发合胞体发生的药物）

作者以为，COVID-19患者肺部合胞体的存在能够是因为SARS-CoV-2 Spike卵白的交融活性所致。在体外试验中，Vero细胞中Spike卵白cDNA的表白会招致合胞体的发生。当这些细胞表白ACE2受体时，它们在质膜上的存在也会触发异源细胞的交融。在较高的缩小倍数下，表白Spike的Vero细胞和Spike阳性合胞体呈现年夜量的质膜崛起，显示出丝状伪足延伸并与附近细胞的质膜打仗。这些表白Spike的细胞和合胞体在其细胞质中显示出突然的钙（Ca2 +）震荡征象。与SARS-CoV-2相反，表白来自SARS-CoV的spike卵白时则未察看到合胞体的造成，而MERS-CoV spike卵白过表白也具备显明的匆匆合胞体发生的个性。

（图2，特定药物克制SARS-CoV-2感化引发的Ca震荡以及病毒复制才能）

进一步，作者愿望找到克制SARS-CoV-2 Spike介导的细胞交融的，曾经被临床同意的药物。对此，他们开辟了两种使用高内在成像进行高通量挑选（HTS）的检测办法。第一个基于Vero和表白Spike的U2OS细胞之间的异源交融（细胞交融克制阐发，CFIA），第二个基于Vero细胞中Spike间接表白（合胞体克制阐发，SIA）。通过这两种办法，作者挑选了两个得到FDA / EMA同意的药物库（Prestwick化学库和The Spectrum Collection，MS Discovery）中的3825种药物。除去独特存在的药物分子之外，这两个库中合计3049种分歧的小分子承受了挑选。

CFIA成果标明，Prestwick的57种药物和MS Discovery库的84种药物可能克制Spike介导的交融，此中Niclosamide的射中排名在Prestwick库中最高，在MS Discovery库中排名第二。

后续研讨发现，此中最无效的分子之一是Niclosamide，它可以通过克制TMEM16F / Anoctamin6（钙激活的离子通道和scramblase的活性，使细胞外表的磷脂酰丝氨酸裸露）而显著削弱Spike表白细胞中的钙振荡和膜电导反馈。这些发现提示了COVID-19疾病发病机制的潜在机制，并强调了使用Niclosamide进行COVID-19医治的后劲。（100医药网100yiyao.com）

原始出处：Braga, L., Ali, H., Secco, I. et al. DNature (2021). https://doi.org/10.1038/s41586-021-03491-6