Mol Ther: 靶向中枢神经细胞腺相关病毒载体疗法有助于医治甲基丙二酸血症

2021年4月12日讯/100医药网BIOON/---甲基丙二酸血症（MMA）是一种重大的代谢错乱，最罕见的病因是甲基丙二酰辅酶A渐变酶（MMUT）基因的渐变。 MMA患者往往会阅历多体系的疾病表示，即便在肝移植后也仍旧存在神经体系疾病停顿的危险。是以，将MMUT保送至中枢神经体系（CNS）能够会为患者提供神经维护，乃至能够为医治带来利益。 为了专门针对MMA患者年夜脑的医治，来自美国NIH的Charles P. Venditti团队开辟了一种神运营养性的PHP.eB载体，该载体使用CaMKII神经特同性启动子来限定MMUT转基因在神经中的表白，并载有上述基因的腺相关病毒（AAV）载体递送给患有MMA的小鼠模子。相关成果颁发在比来的《Molecular Therapy》杂志上。

（图片起源：www.nature.com） 起首，作者查询拜访了家养型小鼠各个组织中的人造Mmut表白环境。对此，作者奶搜集了未经医治的家养型杂合子Mmut +/-小鼠的各个部位组织，包含年夜脑，肝脏，肾脏，心脏和骨骼肌。 RNA原位杂交显示：在一切研讨的年夜脑区域（包含纹状体，头绪丛，海马，中脑，脑桥，丘脑和年夜脑皮层）均表白人造Mmut卵白。其染色点位于细胞内的，且呈弥散状。对非CNS组织的阐发显示，人造Mmut在肾脏和肝脏中的表白最高，骨骼肌和心肌中呈较低的程度。

（图1，MMUT在小鼠各组织中的表白程度）

然后，作者使用AAV申报基因载体试图向小鼠中枢神经体系中通报目标基因。Mmut –/–小鼠， TgINS-MCK-Mmut小鼠和Mmut +/-小鼠在出身当天承受眶后窦AAV-GFP申报载体打针医治，并在第21天搜集组织进行检测。通过eGFP的表白检测AAV的通报环境。通过对整个年夜脑区域进行成像发现，AAV在头绪丛中的通报效率最高。通过将GFP和神经元标志NeuN独特染色，发现 PHP.eB和AAV9载体可能在纹状体中指导GFP的表白。此外，基因型对GFP + / NeuN +细胞的散布没有显著影响。

（图2，靶向医治可进步MMUT在年夜脑中的表白程度） 此外，研讨成果标明 PHP.eB-AAV载体可通报至包含纹状体在内的多个年夜脑区域，并能使MMUT在基底神经节中高程度表白。在中枢神经体系特同性校订MMUT表白后，与疾病相关的代谢产品甲基丙二酸和2-甲基柠檬酸在被医治的MMA小鼠血清中显著下降。上述成果标明，使用嗜神经性衣壳将MMUT表白靶向CNS，可下降甲基丙二酸血症中轮回代谢产品的负荷，并进一步突出了在肝组织外进行靶向医治对无机酸代谢错乱的益处。（100医药网 100yiyao.com） 原始出处：Francis J. May, PamelaSara E. Head, Leah E. Venturoni et al., Molecular Therapy (2021). DOI:https://doi.org/10.1016/j.omtm.2021.04.005