Cancer Cell: p53渐变影响人造免疫旌旗灯号并匆匆进肿瘤的免疫逃逸

2021年4月14日讯/100医药网BIOON/--- p53渐变（mtp53）是众所周知的匆匆癌基因。在比来一项研讨中，来自Stony Brook年夜学的Luis A. Martinez团队申报了一种新的机制，通过该机制，mtp53克制细胞自立和非细胞自立旌旗灯号，从而匆匆进癌细胞存活和回避肿瘤免疫监督。相关成果颁发在比来的《Cancer Cell》杂志上。

（图片起源：www.cell.com） 为了确定mtp53是否调理后天性免疫旌旗灯号通路，作者最初在人乳腺癌细胞BT549（p53R249S）和MDA-MB-231（p53R280K）和胰腺细胞株MIA PaCa-2（p53R248W）（人源）和KPC（p53R172H）（鼠源）进行了shRNA介导的mtp53敲低。在一切四个细胞系中，作者察看到mtp53敲低招致TBK1及其底物IRF3和STING磷酸化。虽然小鼠和人p53靶向序列是分歧的，但它们都发生类似的反馈。此外，作者测验考试了其它两种分歧的p53 shRNA，异样发现其可能在MDA-MB-231细胞中也诱导TBK1底物磷酸化，从而扫除了shRNA中靶效应。此外，通过比拟来自p53-/-或mtp53（p53R172H / R172H）小鼠模子的小鼠胚胎成纤维细胞（MEF），作者发现mtp53与TBK1，IRF3和STING的磷酸化下降相关。在此根底上，作者构建了4T1小鼠乳腺癌细胞系（其缺乏p53基因）以表白R249S 渐变的mtp53，发现这些细胞的TBK1底物磷酸化程度下降。 mtp53（R280K）在两种分歧类型的正凡人成纤维细胞中过表白，异样下降了TBK1及其底物IRF3和STING的磷酸化。这些数据标明，mtp53具备阻断后天免疫旌旗灯号通路的活性。

（图1，p53渐变克制人造免疫细胞的通报） 与mtp53相反，在人类肺癌A549细胞中应用shRNA敲低家养型p53的表白程度，招致STING，TBK1和IRF3的磷酸化下降。此外，诱导表白家养型p53的人肺癌H1299细胞中察看到TBK1，STING和IRF3磷酸化添加。这些卵白质的磷酸化能够反映了IFI16在p53介导下的活性，其与cGAS协同作用激活TBK1-STING-IRF3旌旗灯号。然而，IFI16程度不受分歧细胞系中mtp53敲低或过表白的影响，是以，家养型p53和mtp53在后天免疫旌旗灯号传导路径的节制中以相反的方式起作用。

（图2，p53渐变影响IRF-3定位以及其介导的细胞凋亡）

在后天免疫路径激活后，STING和IRF3会从新定位到分歧的细胞内区间，是以作者研讨了mtp53是否改动了其亚细胞定位。对STING和ERGIC的染色标明，STING在高尔基体中的定位与先前报道的察看成果一致，即它在癌细胞中具备活性。此外，数据显示cGAS和STING敲低可下降TBK1和IRF3磷酸化。紧张的是，在BT549和MDA-MB-231细胞顶用cGAMP处置可以进一步进步STING和ERGIC的共定位。

接上去，作者查看了mtp53是否节制IRF3易位。 IRF3在未刺激的细胞中存在于细胞质中，但在激活STING / TBK1 / IRF3路径后，它会转移至细胞核。为了评价mtp53是否调理IRF3的亚细胞定位，作者在具备强力霉素诱导的mtp53R248W的H1299细胞中稳定表白了GFP-IRF3。在未诱导的细胞中，GFP-IRF3存在于细胞质中，颠末HT-DNA处置后，约90％的细胞中GFP-IRF3转移至细胞核中。相反地，mtp53表白削弱了GFP-IRF3对HT-DNA处置的反馈，细胞核内GFP-IRF3的比例不到20％。综合数据标明，mtp53可能障碍IRF3的核易位。

胞质DNA旌旗灯号可能激活IRF3，进而诱导响应的转录进程。与此同时，DNA旌旗灯号也诱导IRF3依赖性细胞灭亡，即IRF3与BAX互相作用并匆匆进线粒体孔的造成和凋亡。作者发现，经HT-DNA处置24小时的H1299细胞中年夜约40％呈现凋亡，而上述征象在shRNA介导的IRF3敲除后不再呈现，标明细胞对HT-DNA诱导的凋亡反馈是IRF3依赖性的。为了研讨mtp53是否可能克制这种凋亡反馈，作者在MDA-MB-231细胞中敲低mtp53并用HT-DNA处置。 成果标明，HT-DNA处置可诱导约30％的对照细胞凋亡，而mtp53敲低细胞的凋亡反馈更为显明。另外，将mtp53敲除和IRF3敲除相联合，可将凋亡反馈下降至20％。总体而言，这些数据标明表白mtp53的细胞未能激起对cGAS / STING / TBK1 / IRF3路径活化的细胞人造免疫反馈。末了，作者发现mtp53可能克制TBK1-STING-IRF3复合体的造成，从而从分子机制层面提醒了其负向调理人造免疫旌旗灯号的起因。

综上，作者发现Mtp53烦扰了激活后天免疫反馈中细胞质DNA介导的cGAS-STING-TBK1-IRF3的旌旗灯号通报。 提醒了肿瘤细胞抵制免疫监督的内涵起因，并未将来的肿瘤免疫医治提供了新的思绪。（100医药网 100yiyao.com）

原始出处：Monisankar Ghosh, Suchandrima Saha, Julie Bettke. Cancer Cell (2021). DOI:https://doi.org/10.1016/j.ccell.2021.01.003