EMBO Mol Med：提醒应用DR5冲动剂抗体医治三阴性乳腺癌和卵巢癌等实体瘤为何多次遭逢失败

PD-L1稳定化与CSN5有关，但依赖于卵白酶。图片来自EMBO Molecular Medicine, 2021, doi:10.15252/emmm.202012716。

为此，这些作者应用CRISPR-Cas-9办法天生DR5基因敲除（DR5-KO）TNBC肿瘤细胞。所发生的DR5-KO肿瘤细胞对DR5冲动剂不敏感，也没有发动肿瘤细胞外表上的PD-L1。必需指出的是，与DR5家养型肿瘤细胞相比，TNF-α介导的PD-L1稳定化在DR5-KO肿瘤细胞中坚持不变。在DR5冲动剂处置后，卵白酶体的调理亚基S5a/PSMD4仅在DR5家养型肿瘤细胞中降解，但在DR5-KO肿瘤细胞（或DR5抵制性肿瘤细胞）中没有降解。此外，TNF-α旌旗灯号稳定化PD-L1而不影响S5a程度。思索到DR5冲动剂降解S5a代表了对卵白酶体功效的烦扰，在DR5冲动剂抗体Lexa或KMTR2处置后，整体泛素旌旗灯号仅在DR5敏理性肿瘤细胞裂解物中添加，而在DR5-KO肿瘤细胞中没有添加。总的来说，这些成果证明了PD-L1稳定化的两种分歧的卵白酶体烦扰机制，此中的一种通过让PD-L1去泛素化起作用，而另一种通过降解卵白酶体亚基起作用。 进一步的试验标明位于DR5冲动剂旌旗灯号通路上游的ROCK1在协助发动细胞外表上外部稳定化的PD-L1（能够通过CMTM6或其他未知机制）方面起侧重要作用。

为了在体内异质性混合肿瘤移植前提下研讨用于临床测试的人DR5冲动剂，这些作者将人DR5细胞外构造域（ECD）与小鼠DR5的跨膜构造域（TM）和细胞内构造域（ICD）交融在一路。由此造成的DR5构建体通过慢病毒感化在小鼠4T1、MC38和ID8肿瘤细胞中表白，并将表白DR5构建体的细胞移植到小鼠体内。通过展开小鼠存活研讨，他们发现相比于仅靶向DR5或PD-L1，独特靶向DR5- PD-L1、DR5-ROCK1或许DR5-PD-L1-ROCK1显著添加它们的存活。进一步的试验标明这种功效靶导游致肿瘤中的CD8+CD45+T细胞和CD4+CD45+T细胞显著富集。相比于仅承受DR5冲动剂抗体处置，同时承受DR5冲动剂抗体和PD-L1克制剂处置让肿瘤具备较高的CD8+/CD4+比例，具备较高的颗粒酶B活性（细胞毒性T细胞功效的一种标记），与此同时，这两种结合处置并不添加肿瘤中调理性T细胞的活性。这标明这种结合处置可添加DR5冲动剂抗体的抗肿瘤免疫功效和杀灭才能。

接上去，这些作者通过基因改革将PD-L1克制剂avelumab和小鼠DR5冲动剂抗体MD5-1整合到一种称为avelu-MD5-1的双特同性抗体中，这种双特同性抗体不仅阻断PD-L1的免疫克制功效，同时还可能加强DR5-DISC丛聚。当在TNBC同源肿瘤模子中进行测试时，avelu-MD5-1招致肿瘤完整消退，相比之下，仅使用相似剂量的avelumab或MD5-1只能让坚持稳定。

综上所述，这些作者发现了DR5冲动剂抗体激活PD-L1的不测发现。他们还发现DR5冲动剂抗体激活的caspase-8和ROCK1旌旗灯号通路调理PD-L1的稳定化和肿瘤细胞外表发动。此外， ApoEV有助于将稳定化的PD-L1库从DR5敏理性的肿瘤细胞转移到混合异质性肿瘤中的DR5抵制性肿瘤细胞，从而强化免疫克制肿瘤微情况。结合靶向DR5-ROCK1或DR5-PD-L1可以进步DR5冲动剂抗体的抗功效。（100医药网 100yiyao.com）

参考材料：

Tanmoy Mondal et al. . EMBO Molecular Medicine, 2021, doi:10.15252/emmm.202012716.