单细胞交融卵白共表白方面最新研讨结果

近日，上海交通年夜学丁显廷传授和谢陆地助理研讨员团队在Advanced Materials杂志上颁发论文，报道了一种基于微芯片免疫印迹办法的单细胞转染效率阐发芯片（scTAC），用于疾速精确地阐发数千个宿主细胞个别中外源基因的表白差别。scTAC不仅可以对单个细胞中外源基因表白活性的信息进行敏锐、疾速、精确的阐发，还可以用于稀有细胞转染效率的阐发和转染办法的评价。

转染是细胞生物学中研讨特定基因功效的根本办法。构建具备荧光卵白标签的交融卵白，关于评价基因编纂效率，追踪卵白旌旗灯号以及无损研讨功效（例如细胞周期）至关紧张。然而，即便在胜利转染的细胞中，因为简单的酶情况和卵白翻译修饰机制，交融基因的不完整共表白环境会发生普遍的假阳性旌旗灯号。同时，外源基因的表白产品在分歧的细胞阶段出现出高度的动静变动个性，形成转染细胞个别基因表白的异质性。此外，关于一些难以转染的细胞，如、基因编纂细胞，因为细胞数目极为稀疏，难以采取传统的办法如Western Blot、荧光流式分选技术阐发相关基因表白信息。这些成绩对现有的细胞转染技术中成果的靠得住性，转染办法的无效性和精确性组成严峻挑战。

为相识决这些难题，该研讨报道了一种单细胞转染效率阐发芯片（scTAC），每个芯片有2000个微孔阵列，多个芯片并行可以完成高通量检测，可能从成千上万个细胞中迅速挑选已胜利转染的细胞，并可对单细胞中的外源基因的共表白环境进行精确阐发，还可对细胞内相关旌旗灯号通路中卵白质表白进行阐发。

该研讨报道了应用scTAC对转染后的细胞进行准确定位，通过火析荧光卵白和靶卵白的表白强度，得出靶卵白的表白与荧光卵白的表白并非老是具备一致性，从而阐明传统办法中使用荧光卵白进行靶卵白表白程度评价成果的不行靠性。(100yiyao.com）