亲和质谱技巧：药物靶标配体的高通量挑选

疾病相干的药物靶标卵白与的亲和感化研讨是当今开辟新药分子的热门范畴。亲和质谱技巧（Affinity Selection Mass Spectrometry）作为一种直接挑选小分子配体的办法，曾经胜利使用于很多受体、酶等靶卵白的配体的挑选，而且获得了普遍的使用。

亲和质谱剖析的根本道理是：起首取得配体与靶卵白联合的复合物，尔后采取某种纯化办法将复合物与溶液中未联合的配体别离，最初对从复合物中解离上去的配体停止液质联用剖析从而判定其配体构造。研讨者平日从年夜量化合物库中挑选出与靶卵白产生特异联合感化的小分子配体，如斯的混杂物挑选方法可以明显进步挑选通量和下降本钱。

水雯箐研讨员2016年终参加上海科技年夜学，在iHuman研讨所树立了配体挑选与组学技巧课题组，是国际较早展开亲和质谱用于药物靶标配体高通量挑选的学者之一。其团队的研讨以谱技巧为焦点，联合生物化学、剖析化学、药物化学和盘算生物学等手腕，环绕症结药物靶标卵白尤其是G-卵白偶联受体家族展开配体发明和感化机制的研讨。

G-卵白偶联受体（GPCR）家族是细胞外表最次要的受体，它们在各类心理病理进程中都起着焦点调控感化，是极端主要的药靶家族。因为传统办法如外表离子共振技巧（SPR），核磁共振技巧（NMR）等对卵白纯度和波动性有较高请求，且通量较低，是以，针对GPCR靶标的化合物库挑选和配体表征须要开辟新技巧。水雯箐课题组应用SCIEX TripleTOF？6600零碎开辟了基于亲和质谱技巧的高通量、无标志的配体挑选办法，用于GPCR 小分子配体的挑选。该研讨结果揭橥于Chemical science 2018， 9， 3192-3199：High-Throughput Identification of G Protein-Coupled Receptor Modulators through Affinity Mass Spectrometry Screening。

水教师引见说：“亲和质谱配体挑选技巧的症结有如下几点，样品方面须要有年夜量化合物库的累积，针对特定的靶标卵白须要优化亲和选择的办法和流程，质谱剖析方面则须要较高的仪器敏锐度和分辩率从而包管从不计其数的小分子混杂物中判定有亲和力的化合物，而对年夜量小分子的平行处置才能有利于疾速提取能够的配体峰旌旗灯号。SCIEX 高分辩质谱TripleTOF？6600和PeakView？为亲和质谱挑选供给了很好的助力。

试验中我们只挑选了4333 个化合物，判定到了12 个已知的5-HT2CR 小分子调控剂，并发明了若干未知的新构造配体。经过进一步的放射性同位素配体试验和细胞钙流试验，我们发明了一个感化于5-HT2CR 的新构造拮抗剂。另一个我们研讨的GPCR 靶标人胰高血糖素样肽-1 受体（GLP-1R）则更具挑衅性。关于该受体，今朝已报道的非肽类小分子调理剂非常罕有。应用我们的高通量亲和质谱挑选技巧，联合放射性同位素配体试验以及细胞活性试验，我们发明了4 个特异靶向GLP-1R 的新型别构冲动剂。”

亲和质谱技巧联合了卵白质亲和纯化办法与小分子质谱技巧，为年夜范围得挑选与靶卵白存在互相感化的小分子配体供给了一种非倾向性、零碎性的研讨办法。该办法已被胜利使用于多种可溶性药靶卵白的配体挑选，并与生化和细胞功效试验慎密联合，在发明新型先导化合物方面潜力宏大，同时关于提醒一些症结旌旗灯号转导通路中的新靶标具有很好的优势。跟着高分辩质谱在敏锐度和笼罩度上的不时晋升，可预感亲和质谱技巧在卵白靶向的自然活性化合物挑选和胞内代谢物调控卵白质功效等范畴都将发扬出愈加凸起的感化。(100yiyao.com）

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