Nat Biotechnol：迷信家胜利应用CRISPR技巧完成剂量依附性的基因表达激活

2019年11月15日 讯 /BIOON/ --近日，一项登载在国际杂志Nature Biotechnology上的研讨申报中，来自北卡罗来纳年夜学Eshelman药学院等机构的迷信家们经过研讨开辟了一种新办法，可以应用CRISPR基因编纂技巧停止剂量依附性的基因表达激活，文章中，研讨人员描绘了若何应用这种技巧以一种可交换的办法来改动基因表达以及其任务的道理和机制。

图片起源：CC0 Public Domain

此前研讨成果标明，CRISPR/Cas9基因编纂技巧能克制或激活基因的表达，但截至今朝为止，其并不克不及用来增进剂量依附性的基因表达激活；这项研讨中，研讨人员就发明了一种新办法，其能应用化学表不雅润饰物（CEMs，chemical epigenetic modifiers），经过应用部门内源性染色质-激活器来激活所需的基因停止表达，这或许就能清除外源性转录激活剂的需要性。

研讨者发明的新办法包含两种组分，个中第一种就是Cas9，其能与联合卵白FKBP一路催化掉活；第二种就是应用FK506制作的CEM，其能与特别的分子相干联，而这种分子则能与所需的细胞表不雅机械互相感化；详细地说，这种新办法可以制作激活CEM的分子，而该分子能协助寻觅基因激活机械，包含CEM114、CEM87和CEM88，诸如斯类分子能与分歧的酶类相联合，上述两个组分能被用来以研讨者须要的方法激活基因的表达。

随后研讨人员检测了这种新型零碎，即应用绿色荧光卵白沾染HEK293T细胞，随后对表达导向RNA和非活性Cas9的细胞停止计数，紧接着研讨者应用质粒表达和上述三种CEMs中的一种来检测基因表达的激活情况，他们必需等候两天赋可以确认，能否与未处置的细胞比拟绿色荧光卵白的表达量会产生添加，研讨者还细心剖析了用CEMs处置过的掉活Cas9，来肯定能否CEM零碎能以一种所需的方法激活绿色荧光卵白，在该进程中，研讨者发明，应用CEM87停止处置是独一可以添加绿色荧光卵白表达的办法。最初研讨者表现，这种新型技巧可以用来在验证性研讨平分析剂量依附性的基因表达激活情况。（100医药网100yiyao.com）

原始出处：

Anna M. Chiarella, Kyle V. Butler, Berkley E. Gryder, et al. , Nature Biotechnology (2019). DOI: 10.1038/s41587-019-0296-7