Cell?Stem?Cell：挑衅惯例!本来以为在构建iPS细胞中至关主要的Oct4实践上并不须要

2019年11月12日讯/BIOON/---自从2006年日本迷信家山中伸弥（Shinya Yamanaka，现在是日本京都年夜学iPS细胞研讨与使用中间担任人）发明了一种将完整分化的细胞引诱回多能性形态的办法以来，迷信家们不断在应用他的配方来发生引诱性多能（induced pluripotent stem cell, iPS细胞, iPSC）。这种办法依附于所谓的山中因子（Yamanaka factor）---四种转录因子：Oct4、Sox2、Klf4和cMyc（统称为OSKM）---的过度表达。虽然这种技巧靠得住地发生了iPS细胞（下称OSKM 细胞），然则它能够招致意想不到的影响，个中的一些影响会招致细胞癌变。是以，人们尽力挑衅这种配方并懂得每种山中因子的功效。

在不强制Oct4过表达的情形下，没有人胜利地构建细胞。有人以为它是这四种转录因子中最症结的因子。至多到如今为止是如许的。

四年前，德国马克斯普朗克分子生物医学研讨所Hans Sch?ler试验室的研讨生Sergiy Velychko和他的团队其时正在研讨Oct4在应用小鼠胚胎成纤维细胞发生iPS细胞中的感化。他应用将编码Oct4的基因的各类渐变以及阴性对比---不携带任何Oct4的---导入到他正在研讨的细胞中。他受惊地发明即使应用他的阴性对比，他依然可以发生iPS细胞。Velychko的试验标明仅应用SKM（即Sox2、Klf4和cMyc）就能够发生iPS细胞（下称SKM 细胞）。

Velychko告知《迷信家》杂志，“我们只是想宣布这一不雅察成果”，但他晓得他须要起首重现这一成果，否则“审稿人是不会信任的”。

在一项新的研讨中，他和他的同事们，包含Sch?ler试验室资深迷信家Guangming Wu，对这一试验停止了数次反复，用这四种转录因子的分歧组合对停止改革。SKM可以引诱小鼠胚胎成纤维细胞呈现多能性，引诱效力年夜约为OSKM的30%，然则所发生的iPS细胞质量更高，这 意味着这些研讨人员并没有不雅察到罕见的脱靶表不雅效应存在的证据。相干研讨成果于2019年11月7日在线揭橥在Cell Stem Cell期刊上，论文题目为“Excluding Oct4 from Yamanaka Cocktail Unleashes the Developmental Potential of Cs”。

图片来自Cell Stem Cell, 2019, doi:10.1016/j.stem.2019.10.002。 以色列耶路撒冷希伯来年夜学研讨员Yossi Buganim（未介入这项新的研讨）说明道，“效力并不主要。效力意味着可以取得若干细胞集落。假如集落质量低下，最终分化的细胞产生癌变的机遇十分高。”

最初，这些研讨人员停止了最终测试，即四倍体互补测定法（tetraploid complementation assay），在这种办法中，iPS细胞与晚期胚胎集合在一路，不然它们无法自行构成功效齐备的胚胎。这些胚胎长成小鼠幼崽，这意味着他们构建出的细胞可以分化这种植物中的每种细胞。

更主要的是，他们发明SKM iPS细胞发育成正常小鼠幼崽的频率是OSKM iPS细胞的20倍，这标明经过从这种重编程因子配方（即OSKM）中删除Oct4，细胞的多能性可以获得极年夜进步。

Buganim提示道，这些成果将须要在人体细胞中加以验证。他的团队开辟出的这种构建C的办法在小鼠细胞中任务优越，但在人体中却完整有效。

山中伸弥自己对这些成果充斥热忱，在一封电子邮件中告知《迷信家》杂志，他的团队确定会在其他的细胞类型中测验考试这种办法，尤其是“成年人血细胞和皮肤成纤维细胞”。假如这种办法在成年人细胞中起感化，那么这关于细胞的临床使用将是一个宏大的优势。”（100医药网 100yiyao.com）

参考材料：

1.SergiyVelychko et al. . Cell Stem Cell, 2019, doi:10.1016/j.stem.2019.10.002.

2.Oct4, Considered Vital for Creating iPSCs, Actually Isn’t Needed

https://www.the-scientist.com/news-opinion/oct4--considered-vital-for-creating-ipscs--actually-isnt-needed-66697