Nature:迷信家揭秘天然机械子宫! |
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懂得组织和器官造成的发育进程是发育生物学中的一个根本成绩。在哺乳植物中,这一进程产生在胚胎植入子宫之后,这使得胚胎绝对难以察看和操作。是以,从原肠后期到器官产生的一系列发育变乱仍有待完整相识,也难以把持。树立支持植入后小鼠胚胎在子宫情况外正常恒久发育的培育前提仍旧具备挑战性。
基于此,来自以色列雷霍沃特魏兹曼迷信研讨所分子遗传学系的Jacob H Hanna传授率领团队开辟了高度无利的子宫外植入后小鼠胚胎培育平台,该平台可能在胚化之前(E5.5)直到后肢造成阶段(E11)进行恰当的胚胎发育。该研讨结果以“Ex utero mouse embryogenesis from pre gastrulation to late organogenesis”为题在线颁发在《Nature》 杂志上。
研讨职员一开端就测试干了细胞研讨中一些新树立的细胞培育弥补剂或生物力学原理是否有助于应答这一挑战(例如,压力节制、弥补剂、合成血清等)。并且在转鼓上使用了“滚筒培育体系”,并将其与定制的外部开辟的电子气体调理模块集成在一路,该模块不仅可以高敏锐度地准确节制O2和CO2程度,并且还可以节制年夜气压力。后者的念头是压力添加向组织保送氧气的才能,以及证实年夜气压力若何改动细胞成长的研讨。同时树立了支持E7.5前期原肠胚(神经板和头褶阶段)成长到后肢造成阶段(~E11)的前提,效率很高。
接上去研讨职员发现,25%DMEM、50%年夜鼠血清(RS)和25%人脐血清(HCS)的混合物继续支持胚胎成长,其效率比只使用年夜鼠血狷介得多,并将这种培育基定名为体外培育液(EUCM)。值得注意的是,每24小时向EUCM弥补额定的葡萄糖,直到培育期停止,关于降服培育两天后的发育异常至关紧张。每24小时次序添加氧气程度是最抱负的,从E7.5的5%O2开端,E8.5的13%,E9.5的18%,E10.5的21%O2停止。此外,坚持6-7磅/平方英寸的气压关于正常和无效的开辟也是至关紧张的。该方案在培育4天后,在分歧小鼠品系中得到约77%的正常胚胎发育。4天后,胚胎开端呈现异常,卵黄囊轮回中止,心包积液,并在一夜之间迅速灭亡。
综上,该研讨团队申报了一种强健的胚胎培育体系的树立,该体系充沛地归纳综合了小鼠在子宫内的植入后发育,从原肠后期发育到器官产生的高级阶段,使小鼠胚胎的内部和外部操作得以利用和监测,最长可达6天的植入后发育。将哺乳植物胚胎从子宫情况中移出并在受控前提下正常成长的才能是表征从原肠发育到器官产生时代分歧扰动对发育影响的无力对象,可以与遗传修饰、化学挑选、组织处置和显微镜办法相联合。这项任务初次证实在哺乳植物中,原肠造成和器官产生的进程可以在培育皿中完整和充沛地结合重现。后者强调了胚胎的自组织个性,并为扩展来自干细胞凑集胚胎和分歧哺乳植物物种的合成胚胎研讨奠基了根底。(100医药网 100yiyao)
参考文献
1、Aguilera-Castrejon A, Oldak B, Shani T, et al. Ex utero mouse embryogenesis from pre-gastrulation to late organogenesis. Nature. 2021 Mar 17. doi: 10.1038/s41586-021-03416-3. Epub ahead of print. PMID: 33731940.2、Ritchie ME, Phipson B, Wu D, et al.limma powers differential expression analyses for RNA-sequencing and microarray studies. Nucleic Acids Res. 2015 Apr 20;43(7):e47. doi: 10.1093/nar/gkv007. Epub 2015 Jan 20. PMID: 25605792; PMCID: PMC4402510.
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