徕卡多光子显微镜免疫学利用：提醒巨噬细胞发扬血小板功效的机制

图3.巨噬细胞超疾速召募和疤痕造成 徕卡DIVE体系对本研讨的助攻 不得不说，作者对徕卡DIVE显微镜的使用已到达出神入化的境地，使DIVE的劣势在本文中体现得酣畅淋漓。为了增进对这台专精于组织深层显微成像体系的相识，咱们就来看看DIVE是若何助攻这篇《Science》年夜作的。

图4.徕卡DIVE成像体系4Tune检测器 徕卡4Tune外置RLD检测器：检测范畴自在可调的光谱型检测器。

精准检测二次谐波 本文中相称一部门组织成像采取了二次谐波（Second Harmonic Generation，SHG）旌旗灯号作为组织内参旌旗灯号。SHG旌旗灯号无需标志、旌旗灯号强度不受光漂白影响且在纤维、胶原等丰厚的组织中普遍存在，是多光子成像罕用的组织标志。其成像难点在于：传统的双光子体系的滤片式成像无奈防止SHG成像时荧光旌旗灯号共激起招致的串色成绩。徕卡DIVE使用4Tune检测器（图4）不仅能通过挪动检测范畴确定SHG旌旗灯号的真实性，还能轻松地为每个样品找到最得当的SHG检测波段。

机动设置多色成像 本文中作者使用了多个荧光卵白转基因小鼠品系，如：Gata6H2B-Venus小鼠、LysMeGFP小鼠、Ly6GCre-tdTomato小鼠和Csf1RHBEGF/mCherry小鼠等。面临这些激起和发射光谱完整分歧的荧光卵白，只有检测范畴机动可调的成像体系能力胜任本文中多重荧光加SHG检测的工作。这里，不得不为徕卡DIVE体系的检测机动性点个赞。

疾速成像 三维重构 在本文中，还有一些对成像速率要求很高的检测工作，如必要疾速捕获巨噬细胞活动的轨迹和短光阴内实现毁伤部位三维数据的采集等。在这些利用场景中，DIVE的疾速成像功效就十分好用了。合营共振扫描振镜，DIVE帮忙作者完成了巨噬细胞0.04秒内活动轨迹的追踪（图1J，每0.02秒成像一次）。

当然，徕卡DIVE成像体系的劣势技术还有好多（如多光子荧光寿命成像等），联合新上市的STELLARIS共聚焦平台，徕卡DIVE成像体系将以更优秀的状态帮忙越来越多的迷信家们摸索性命的奥妙。（100医药网 bioon）

徕卡 STELLARIS DIVE

参考文献：

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