胎盘间充质干细胞外泌体对高糖培育的成纤维细胞衰老的影响研讨 |
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为了摸索高糖(high glucose,HG)增进体外培育的人皮肤成纤维细胞(human dermal fibroblasts,HDFs)的衰老前提, 天津医科年夜学边晓玮 张翠萍 李炳旻等人别离人包皮组织的HDFs,树立高糖老化模子;不雅察胎盘间充质起源的外泌体(exosomes,Exos)对高糖培育的成纤维细胞增殖、迁徙及衰老的影响。试验分为3组:正常对比组(5.5 mmol/L葡萄糖)、HG1组(26 mmol/L葡萄糖)、HG2组(35 mmol/L葡萄糖)。CCK-8试剂盒检测各组细胞在1、3、5、7 d的增殖情形;各组培育7 d落后行划痕试验,不雅察各组HDFs在24 h内的迁徙率;2′,7′二氯荧光素二醋酸(DCFH)法检测各组培育7 d后细胞内活性氧簇(ROS)程度;细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测各组培育7 d后β-半乳糖苷酶活性。体外培育胎盘间充质(placenta mesenchymal stem cells,PMSCs),差速高速离心法别离Exos。将上述培育的HDFs分为3组:HG2组(35 mmol/L葡萄糖)、HG2+低浓度Exos(5μg/mL)组、HG2+高浓度Exos(50μg/mL)组,培育3 d后,检测细胞增殖情形、迁徙率、ROS程度和β-半乳糖苷酶活性;流式细胞术检测细胞周期;Western blot剖析衰老相干卵白和p21表达情形。
成果显示,与对比组比拟,HG1和HG2组培育的HDFs增殖、迁徙才能分明降低(P 0.01),ROS程度明显降低(P 0.01),β-半乳糖苷酶活性明显添加(P 0.01),并且各目标尤其以HG2组变更最为分明;Exos试验成果显示:高浓度Exos分明增进高糖培育HDFs的增殖和迁徙(P 0.01),明显下降细胞内的ROS程度和β-半乳糖苷酶活性(P 0.01),同时使细胞内p53和p21卵白的表达程度明显降低(P 0.01),而低浓度Exos无分明后果。
胎盘间充质起源的Exos增进高糖培育的HDFs增殖、迁徙,缓解细胞的氧化应激毁伤和衰老形态,其机制能够与衰老相干卵白p53和p21表达下调有关。(100yiyao.com)
小编推举 2021(第五届)外泌体与疾病研究会
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