全文编译!养狗人士当心!我国香港大学研究人员发表Nature论文，指出狗也会被SARS

2020年5月19日讯/BIOON/---当中国香港特别行政区确诊出任何人类COVID-19病例时，有关人士会被送到医院进行治疗，而被视为“密切接触者”的家庭接触者则会在指定的中心接受隔离。患上这种疾病的宠物主人可选择由香港渔农自然护理署（AFCD）照顾和隔离他们的猫和狗。从这些动物身上采集样本，以评估它们是否感染了SARS-CoV-2，并协助确定管理隔离中动物的最佳方法，包括选择把动物送还给它们的主人的时间。截至3月27日，已有15只狗和7只猫从已知有COVID-19病例的家庭中隔离并接受了测试。在此期间，来自中国香港大学的研究人员根据病毒学检测结果，发现两只狗已被SARS-CoV-2感染。相关研究结果于2020年5月14日在线发表在Nature期刊上，论文标题为“Infection of dogs with SARS-CoV-2”。

研究结果

狗病例1是一只17岁的绝育雄性博美犬，之前已患有多种疾病，包括II级心脏杂音、全身性和肺动脉高压、慢性肾脏疾病、甲状腺功能减退和既往肾上腺皮质亢进史。它的主人是一名60岁的女性，于2020年2月12日出现症状，2020年2月24日被为COVID-19疾病。家中一名女佣（继发病例A）于2月16日发烧，随后被确诊为感染。2月26日，该家庭其余3名成员被送往隔离中心，其中1人于3月7日确诊为感染（继发病例B）。

这只狗于2月26日被转送至由香港渔农自然护理署管理的收容所，并收集它的鼻腔、口腔、直肠拭子以及粪便样本。这些研究人员另外还6次从这只狗身上收集用于病毒检测的样本。3月3日采集了它的血液样本进行血清学检测（如图1所示）。在整个隔离期间，这只狗一直保持精神抖擞，临床状况无明显变化。

图1.事件时间表。 在2月26日至3月9日期间从狗病例1身上连续采集的5个鼻腔拭子样本中，采用定量RT-PCR检测到样本中的SARS-CoV-2 RNA（表1）。直肠和粪便样本均为阴性。试图对病毒进行培养，但没有取得成功。鉴于病毒载量较低（每毫升样本的病毒载量为7.5 102至2.6 104个RNA拷贝），病毒培养不太可能成功，这是因为在人类COVID-19患者中，当每毫升样本中的病毒载量小于106时，病毒分离成功的可能性较小。

表1.对狗的鼻腔、口腔拭子的RT-PCR检测结果以及血清学结果。 狗病例2是一只2.5岁的雄性德国牧羊犬，健康状况良好。它的主人于2020年3月10日出现症状，于3月17日被为COVID-19。在3月18日至30日期间，这些研究人员从这只狗身上5次采集了样本。前两次采集的口腔和鼻腔拭子样本均呈阳性（表1）。3月18日采集的直肠拭子样本在六次检测中，有四次均呈阳性，其Ct值（病毒载量较低）均高于口腔和鼻腔拭子样本中的相应数值。在3月18日至30日期间，他们对这户家庭中饲养的第二只狗只进行了5次采样，病毒RNA检测均呈阴性。

在 2020 年 3 月 3 日从狗病例1 身上收集血清样本，2020 年 3 月 19 日、23 日及 30 日从狗病例 2 中身上收集血清样本，然后利用90%蚀斑减少中和试验（PRNT90）测试SARS-CoV-2抗体。狗病例1血清中的PRNT90抗体滴度为1:80，狗病例2的抗体滴度为 1:10（3月19日）、1:40（3月23日）和1:160（3月30日）。3月30日，狗病例2所在家庭中的第二只狗的抗体仍为阴性。20只对照狗血清测试结果为PRNT90中和抗体阴性。

对2月26日和28日从狗病例1身上采集的鼻腔拭子样本中的病毒RNA直接进行了基因测序，并与来自这只狗的主人、继发病例A和继发病例B的临床样本中发现的病毒进行了比较。从指示病例（index case，指的是在一次疫情爆发中符合病例定义，最早发现和报告的病例，这里指的是狗病例1的主人）、继发病例A和继发病例B中获得全病毒基因组序列（29764个核苷酸）。分别从2月26日和28日采集的鼻腔拭子样本中获得了基因组大小为27871个核苷酸（占全基因组的94%）和26025个核苷酸（占全基因组的93%）的病毒序列。来自指示病例（这里指的是狗病例2的主人）和两个继发病例的病毒序列在全基因组中是相同的。对3月18日和19日从狗病例2身上和同一家庭的指示病例身上收集的的鼻腔拭子样本中的病毒RNA进行了基因测序，发现所测序出的全基因组（29764个核苷酸）完全相同。另一方面，这两个家庭携带的病毒也有明显的区别（图2）。这项新研究中获得的基因组序列已被保存在GenBank数据库中，登录号为MT215193、MT215194、MT215194、MT215195、MT270814、MT270815和MT276600。

图2.SARS-CoV-2的系统发育树，显示来自香港受感染的狗和人的病毒。 讨论与结论

这些研究结果表明，这两只狗被SARS-CoV-2感染。已知ACE-2是这种病毒的进入受体，狗ACE-2与人类的ACE-2相似。在已知参与ACE-2与SARS-CoV-2刺突蛋白（S蛋白）受体结合域（RBD）之间相互作用的18个氨基酸中，有5个氨基酸在人与狗之间存在差异，但是这5个氨基酸中没有一个位于已知会破坏SARS-CoV RBD与ACE-2之间相互作用的区域。