Nature子刊：经改良靶向毒性RNA的CRISPR

2020年9月23日讯/BIOON/---强直性肌养分不良I型（Myotonic dystrophy type I, DM1）是最罕见的成人发病性肌肉养分不良。患有这种疾病的人了反复的DNA片断，招致了反复性RNA的毒性聚积。是以，生成患有强直性肌养分不良的人阅历了渐进性肌肉萎缩和衰弱以及其他各类健康症状。

CRISPR-Cas9是一种越来越多地用于校订招致各类疾病的基因（DNA）缺点的技巧。几年前，美国加州年夜学圣地亚哥医学院的研讨人员改动了这种技巧的感化偏向：用一种他们称之为RNA靶向Cas9（RNA-targeting Cas9, RCas9）的办法来润饰RNA。

在一项新的研讨中，这些研讨人员证明一剂RCas9基因疗法可降解有毒的RNA，而且简直完整逆转强直性肌养分不良小鼠模子的症状。相干研讨成果于2020年9月14日在线揭橥在Nature Biomedical Engineering期刊上，论文题目为“The sustained expression of Cas9 targeting toxic RNAs reverses disease s in mouse models of myotonic dystrophy type 1”。

图片来自Nature Biomedical Engineering, 2020, doi:10.1038/s41551-020-00607-7。 论文通信作者、加州年夜学圣地亚哥医学院细胞与分子医学传授Gene Yeo博士说，“很多其他严重的神经肌肉疾病，如亨廷顿病和肌萎缩侧索硬化症（ALS），也是由相似的RNA聚积惹起的。今朝还没有治愈这些疾病的办法。”

平日情形下，CRISPR-Cas9的任务道理是引诱一种名为Cas9的酶切割特定的靶基因（DNA），从而使得迷信家们可以让靶基因掉活或交换靶基因。RCas9的任务道理相似，但Cas9被引诱到一个RNA分子上，而不是DNA。

在2016年的一项研讨中，Yeo团队经过应用RCas9追踪活细胞中的RNA来证明RCas9发扬感化了。在2017年的一项针对试验室模子和来自患者的细胞的研讨中，这些研讨人员应用RCas9清除了95%与强直性肌养分不良I型和2型、一种ALS类型和亨廷顿病相干的异常RNA。

这项新的研讨进一步推动了RCas9疗法：在活的强直性肌养分不良I型小鼠模子中，这种疗法逆转了这种疾病的症状。

这种办法是一种基因疗法。这些研讨人员将RCas9包装在一种非沾染性病毒中，这种病毒将这种RNA切割酶递送到细胞内。他们给这些小鼠打针了单剂RCas9基因疗法或模仿医治（mock treatment，指的是未包装RCas9的病毒）。

RCas9将异常的反复性RNA削减了50%以上，依据组织的分歧而有所变更，并且医治后的强直性肌养分不良小鼠变得与安康小鼠根本没有差别。

后来，这些研讨人员担忧，来自的RCas9卵白能够会惹起小鼠的免疫反响而被敏捷肃清。于是他们测验考试在医治进程中长久地克制小鼠的免疫零碎。成果，他们惊异而又欣喜地发明，他们阻拦了小鼠体内的免疫反响和肃清，让这种病毒及其携带的RCas9货色继续存在，从而发扬它们的医治感化。更主要的是，他们没有不雅察到肌肉毁伤的迹象。相反，他们不雅察到介入新肌肉构成的基因的活性添加。

Yeo说，“这为开端测试靶向RNA的CRISPR-Cas9作为医治其别人类疾病的潜在办法翻开了年夜门---至多有20种疾病由反复性RNA的聚积惹起。”

依然有待不雅察的是，基于RCas9的疗法能否会在人类中起感化，或许它们能否会惹起无害的反作用，如惹起不受欢送的免疫反响。像如许的临床前研讨将协助这些研讨人员找出潜在的毒反作用并评价历久裸露的影响。

2017年，Yeo结合开办了一家名为Locanabio的公司，经过临床前测试放慢RNA靶向CRISPR-Cas9的开辟，并放慢推动到医治强直性肌养分不良和其他潜在疾病的阶段。（100医药网 100yiyao.com）

参考材料：

1.Ranjan Batra et al. . Nature Biomedical Engineering, 2020, doi:10.1038/s41551-020-00607-7.

2.Twist on CRISPR gene editing treats adult-onset muscular dystrophy in mice

https://medicalxpress.com/news/2020-09-crispr-gene-adult-onset-muscular-dystrophy.html