Mol Cancer：CircMYH9通过以p53依赖性方式调理丝氨酸代谢和氧化还原稳态来驱动结直肠癌成长

丝氨酸和甘氨酸 (SG) 代谢作为氨基酸代谢的一个紧张分支，可以支持细胞增殖。circRNA 的失调已在简直一切类型的癌症中被发现，而且参加了许多肿瘤的产生。内含子衍生的circAGO2与人抗原R（HuR）卵白产生物理互相作用，匆匆进其在靶基因的3"大众-非翻译区（UTR）中的竞争性富集，匆匆进肿瘤产生和胃癌的侵袭性，标明内含子 circRNA 在癌症停顿中起着至关紧张的作用。然而，必要表征内含子circRNA的更多功效。

Xin Liu等人鉴定了一个在 CRC 细胞中绝对高表白的内含子衍生的 circMYH9，从机制上证实了 circMYH9 通过克制 p53 前体 mRNA 的稳定性来添加内源性丝氨酸的发生，而且使用腺相关病毒 (AAV) 9 介导的 circMYH9 过表白在小鼠中验证了 circMYH9 在 CRC 癌变中的功效。

CircMYH9 表白在 CRC 组织中上调并预测预后不良

研讨阐发了 CRC 组织中的 circMYH9 表白程度，qRT-PCR 和 FISH 显示 CRC 组织中的 circMYH9 表白高于肿瘤四周组织。统计成果显示circMYH9 程度与肿瘤年夜小、远处转移、淋趋承转移、TNM 分期和 p53 状态显著相关。Kaplan-Meier阐发成果显示circMYH9低表白患者的无复产生存率（RFS）高于高表白患者，危险比为 0.593（95% CI，0.366–0.997）。此外，circMYH9高表白患者的总生活率（OS）显明低于circMYH9低表白患者，危险比为 0.547（95% CI，0.305–0.982）。

CircMYH9通过p53介导的PHGDH上调匆匆进SG代谢

GSEA成果显示差别表白的基因集与SG代谢和p53通路显著相关。研讨通过circMYH9缄默或过表白，发现它与SG生物合成路径基因（PHGDH、PSAT1、PSPH和SHMT2）的表白正相关。与对照细胞相比，shRNA 转染的 HCT116 细胞中的 SG 显著下降，而过表白 circMYH9 的 LoVo 细胞中的 SG 绝对于载体细胞显明添加。Nutlin-3 处置过表白 circMYH9 的 LoVo 细胞逆转了 p53 和 MDM2 的下调，并克制了 SG 生物合成路径基因表白和细胞增殖。circMYH9 过表白异种移动物的 IHC 显示 p53 的表白较低，而 PHGDH 和 PSPH 的表白高于载体细胞的表白。这些成果证明了 circMYH9 在 p53 通路和从头 SG 代谢的调理中的次要作用。

CircMYH9通过p53介导的PHGDH上调匆匆进SG代谢。

p53 3"大众 非翻译区 (UTR) 介导的 hnRNPA2B1 对前 mRNA 稳定性的调理

为了进一步确定 p53 的哪个区域参加稳定性调理，研讨在 HCT116 细胞中进行了 MeRIP-seq，发现一个显明的 m 6 A 峰散布在 p53 mRNA 的 3"大众UTR。同时，hnRNPA2B1 敲低显著下降了 p53 CDS-3公众UTR （而不是独自的 p53 CDS转染）的 CRC 细胞中 p53 的表白。这标明 3公众UTR 关于 hnRNPA2B1 介导的 p53 调理是必不行少的。研讨发现 hnRNPA2B1 敲低下降了包括 p53 3公众UTR 的荧光素酶构建体的活性，而 Mettl3 过表白代偿添加了由 hnRNPA2B1 敲低诱导形成的荧光素酶活性下降。另外，p53 3"大众UTR mut 的萤光素酶活性对 hnRNPA2B1 敲低或 Mettl3 过表白没有反馈。这些数据标明，p53 前体 mRNA 的表白受 hnRNPA2B1与 p53 3"大众UTR 上m6A 位点的联合节制。

p53 3公众 UTR 介导了 hnRNPA2B1 对前 mRNA 稳定性的调理。

CircMYH9在氨基酸褫夺下被ROS-HIF1α通路激活

研讨在缺乏 SG 或缺乏谷氨酰胺 (Glu) 的培育基中培育 CRC 细胞，而且 circMYH9 相应于 SG 或 Glu 褫夺而上调。NAC 在不含 SG 或不含 Glu 的培育基中逆转了 HIF1α 和 circMYH9 的升高。此外，HIF1α 敲除打消了 HCT116 和 LoVo 细胞中 Glu 或 SG 褫夺诱导的 circMYH9 表白。标明 SG 或 Glu 褫夺诱导的细胞 ROS 积聚添加了 HIF1α 程度，从而匆匆进了 circMYH9 的表白。HBS1 或 HBS2 的缺失部门打消了 HIF1α 敲低或过表白对 MYH9 荧光素酶申报基因活性的克制或匆匆进，而 HBS1 和 HBS2 的缺失则完整打消了 HIF1α shRNA 或质粒对 MYH9 荧光素酶申报基因活性的影响。这些数据标明，HBS 区域关于 SG 或 Glu 褫夺下的 HIF1α 依赖性 circMYH9 转录调控至关紧张。

CircMYH9 在氨基酸缺乏下被 ROS-HIF1α 通路激活。

综上所述，研讨初次证实内含子衍生的 circMYH9 通过调理 SG 代谢和氧化还原稳态匆匆进 CRC 的成长。咱们还确定 p53 作为 circMYH9 的靶标，并标明 circMYH9 可以通过召募 m6A 浏览器 hnRNPA2B1降解 p53 前体 mRNA 来克制 p53 。此外，在 SG 或 Glu 饥饿下鉴定了扩增 circMYH9 的 ROS/HIF1α 路径。研讨突出了 CRC 中 circMYH9 的新机制，为监测和医治 CRC 提供了名贵的资本。（100医药网100yiyao.com）