基于涡流喷射装置的免疫印迹分析方法的研发 |
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来源:网络2022-05-09 15336035
免疫印迹分析(IAs)广泛用于检测生物标志物。然而,传统方法昂贵、耗时、相对复杂,且易受背景干扰,影响检测灵敏度。
免疫印迹法(Immunoblotting)又称蛋白质印迹法,是根据抗原与抗体的特异性结合来检测复杂样品中某种蛋白质的方法,是一种免疫生化技术。
免疫印迹是高分辨率和免疫化学分析技术的结合。免疫印迹法具有分析容量大、灵敏度高、特异性强等优点。它是检测蛋白质的特性、表达和分布最常用的方法之一,如组织抗原的定性和定量检测、多肽分子的质量测定、病毒抗体或抗原的检测等。免疫印迹,也称为酶联免疫电子转移印迹(EITB),也称为Western-blot,因为它与Southern印迹相似,Southern印迹是早期在Southern中建立的用于检测核酸的印迹。
免疫印迹分析(IAs)广泛用于检测生物标志物。然而,传统方法昂贵、耗时、相对复杂,且易受背景干扰,影响检测灵敏度。
最近,来自加州大学的一个研究小组开发了一种基于涡流流控装置(VFD)的免疫印迹分析方法,该方法利用薄膜微流控技术提高了免疫印迹的灵敏度,并将检测时间缩短至5分钟。相关研究结果发表在《Angew. Chem. Int. Ed.》,标题为“通过涡流设备加速进行5分钟以下免疫印迹分析”。
研究人员在涡流喷射装置中安装了一个可以快速旋转的石英管作为反应器,将抗原分布在夹在两张滤纸之间的硝酸纤维素膜中,将纸组件卷成圆筒放置在反应器中,并在每个测量步骤之间添加和丢弃密封、结合和洗涤液。结果表明,当反应器以45度倾角放置时,反应器的机械能可以使液体在低转速下通过剪切应力和龙卷风式拓扑流体流动,穿过、进入并覆盖膜。在1500 rpm的转速和4.5分钟的测量时间下,间接噬菌体免疫印迹分析显示出最高的信噪比和最低的误差。
利用涡流喷射装置开发了一种相对高效、经济、易操作的免疫印迹分析方法。涡流喷射装置驱动的快速平衡系统加速了液体分子与固体目标物质的结合,为实时检测技术的发展提供了参考。
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