BMC cancer:杀死肿瘤细胞! |
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来源:100医疗网原创2022-08-31 1:31
最近,中国复旦大学附属中山医院的一个研究小组对一种非病毒mcDNA介导的双特异性CAR T细胞进行了研究,旨在研究其抑制肿瘤增殖的能力。
肝细胞癌(HCC)是世界上最常见的癌症之一,其过继治疗值得研究。CD133,一种癌症(CSC)抗原,已显示与磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)一起在HCC细胞中高表达,并且它们可用作产生嵌合抗原受体(CAR)T细胞的靶标。然而,CAR T细胞治疗存在一定的局限性,如脱靶毒性、转染效率低、抗肿瘤能力弱等。
最近,中国复旦大学附属中山医院的一个研究小组对一种非病毒mcDNA介导的双特异性CAR T细胞进行了研究,旨在研究其抑制肿瘤增殖的能力。
在这项研究中,从健康供体获得外周血,通过密度梯度离心分离T细胞。研究人员利用电穿孔系统将抗CD133和抗GPC3单链片段可变区(scFv)结构作为靶基因导入T细胞。细胞膜被瞬时电流效应打开,目的基因通过非病毒DNA(mcDNA)载体被输送到细胞内。使用流式细胞仪和western blot检测两个scFv是否同时转染以及这种双特异性细胞产生方法的转染效率。然后,采用CCK-8法和HCC异种移植小鼠模型,检测CAR T细胞的体内外抑瘤作用。包含CD133和GPC3抗原识别位点的CoG133-CAR T细胞是效应细胞。将CD133-CAR T细胞和GPC3-CAR T细胞定义为单靶对照组,将正常T细胞和模拟T细胞定义为空白对照组。
McDNA载体适应两种成功转染的靶基因结构以产生双特异性CAR T细胞。基因水平和蛋白水平检测方法证实CoG133-CAR T细胞具有较强的转染效率,并表现出CD133和GPC3的抗原结合能力。与单靶CAR T细胞或对照T细胞相比,CoG133-CAR T细胞在体外对CD133和GPC3双阳性HCC细胞系和体内对HCC异种移植小鼠具有增强的消除作用。苏木精-伊红(H E)染色显示CoG133-CAR T细胞和主要器官无致死脱靶结合。
本研究表明,用非病毒载体制备双特异性CAR T细胞更有效、更安全。CoG133-CAR T细胞通过双重抗原识别和内部激活增强肿瘤抑制。为肝细胞癌(甚至实体瘤)的CAR-T治疗提供了创新策略。
原始资料来源:王H,王X,等. 2022 . 7 . 25;22(1):814.doi : 10.1186/s 12885-022-09861-1PMID: 35879685PMCID: PMC9310485。
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